【研究背景和意义】水稻是世界上最重要的农作物之一，养育着世界近50％的人口。中国是世界最大的水稻生产和消费国，全国60％以上的人口以大米为主食，每年的总产量达2000亿公斤左右。虽然我国水稻生产已取得举世瞩目的成就，但也面临着新的挑战，粮食生产成本高、效益低、国际竞争力弱的情况依然存在。在生态环境中，影响水稻生长的因子多种多样，并且处于动态的变化中，这些环境因子一旦超出水稻忍耐的范围就成为了逆境胁迫因子，对水稻产生危害，导致了巨大的产量和经济损失。水稻病害是其主要的逆境胁迫因子之一，也是影响水稻产量和质量的重要因素之一。特别是真菌病害，具有传染快、危害大等特点。对水稻危害最大的三种病害为稻瘟病、水稻纹枯病、水稻白叶枯病，其中有两种是真菌病害，稻瘟病在流行年份可减产40％～50％，有的田块甚至颗粒无收。近几十年来，防治水稻病害的措施主要是化学防治，但是化学防治对土壤、空气及水体污染严重，破坏了生态环境的平衡。同时导致农药残留在农副产品中，严重影响了人类健康。为了达到既能有效的防治农作物病虫害，又能减少化学农药用量的目的，生物农药以及一些无害防治途径的研究与开发越来越引起广泛重视。 几丁质酶产生菌是一类能够利用几丁质作为碳源而生存、繁殖的特殊微生物种群，其生理生化方面的共同特征就是能够分泌几丁质酶，并通过这些酶的作用将几丁质降解为几丁质寡糖、几丁质二糖直至几丁质单糖。而几丁质酶和几丁寡糖在植物抗病上的应用已经被广泛的报道，而且有研究证实几丁寡糖还能促进植物的生长发育。几丁质酶产生菌是一类很有前途的抗真菌的微生物，因此，在这方面作更广泛更深入的研究是很有意义的工作。 【目的】获得对病原真菌有较好抑制效果的几丁质酶产生菌及其应用技术，初步探索拮抗菌的作用机理。 【内容】分离纯化对病原真菌有较好抑制作用的几丁质酶产生菌，优化产酶条件，研究拮抗菌株对一些病原真菌的抑菌效果，探讨拮抗菌发酵液对水稻幼苗保护酶活性的影响。 【方法】菌种筛选方法：初步分离：采用平板透明圈方法筛选几丁质酶产生菌菌株， 中文摘要产生透明圈的培养基选用分离培养基。将土样（棉用土．稻田土、桔园土、池塘底泥、水产养殖场的泥土等）或植物器官（水稻、棉花、玉米、烟叶及一些蔬菜的根、茎、叶）用无菌水稀释（梯度稀释法人在稀释倍数为 10叶、10刁、10、时分别取 0．sml涂于分离培养基中，30aC培养3～5天，观察透明圈是否产生。二次分离：继续培养得到的菌株，同样用梯度稀释法在分离培养基中培养菌株单个菌落，观察其在分离培养基中生长情况。根据生长情况和产生透明圈的大小选出较好的菌株。三次分离：在含稻瘟病病原菌细胞壁成分的培养基的平板上培养，在二次分离的基础上，观察筛选菌株的生长情况，并检测菌株的几丁质酶话性。微生物几丁质酶活性测定方法：参照 Ac e介绍的方法。抑菌实验的方法：参照擅建新和李力介绍的方法。过氧化氢酶活性测定：按照《植物生理生化实验》中介绍的方法进行。过氧化物酶活性测定方法：按照《生化实验技术方法和技术》中介绍的方法进行。苯丙氨酸解氨酶活性和植物几丁质酶活性测定方法：按照《现代植物生理学实验指南》中介绍的方法进行。 【结果】1．从自然界中筛选到两株产酶能力较强的几丁质酶产生菌，分别编号为H3和 Hg。初步鉴定结果，H3菌株为苏云金芽抱杆菌，Hg可能为盲霉菌。2．产酶条件：H3菌株以细粉几丁质和酵母粉为 C源和 N源，在 30aC、pH72下培养72小时为最佳产酶条件＊ 菌株以细粉几丁质和酵母粉为 C源和 N源，在 35℃，pH6．9下，培养84小时为最佳产酶条件。3H3和 Hg菌株对几种病原真菌有明显抑制作用，H3对稻瘟病、水稻效枯病、棉花枯萎病、小麦赤霉病、黄瓜枯萎病的抑菌率分别为 73．l％、44．3 ％、62．5 ％、50上％、56．3％：＊9对它们的抑菌率分别为58．2％、忙＊％、56．3％、27．2％、36石％。4．H3菌株发酵液处理水稻种子后，接种稻瘟病，培两优288出苗率、苗高、百苗干物重分别为 31．5％，11．2上1．6cm、1．95土0 089；旱干 127出苗率、苗高、百苗干物重分别为65 ％、12．5土2．Icm、1．67土0．119；新香优80出苗率、苗高、百苗干物重分别为42％、13．2士2，ZCm、2．06土0．149。Hg菌株发酵液处理后，培两优288出苗率、苗高、百苗干物重分别为 33％、8＊h石cm、1．87上0 069。旱干 127出苗率、苗高、百苗干物重分别为 57．5％、11．4士2．Zcm、1．59上0 079；新香优 80出苗率、苗高、百苗干物重分别为35％、11．5土3．ocm、2．10土0．15g。与对照相比均有明显提高。5两株几丁质酶产生菌的产酶发酵液（含几丁质底物）能诱导水稻幼苗保护酶系活性的 改变，使其朝着有利于水稻幼苗生长和抵抗不利因素的方向发展，产酶发酵液作用比