近年来,智能型纳米技术的快速发展对肿瘤靶向制剂的研究产生了巨大的推动作用。其中,针对肿瘤微环境所制备的智能型纳米颗粒更是在肿瘤的靶向治疗上取得了良好的效果。本论文利用肿瘤微环境弱酸性的特点,合成了一种pH敏感的智能型纳米药物载体,该纳米药物载体载可通过响应pH的改变来实现电荷转换以及可控制地穿膜,从而将抗癌药物阿霉素(DOX)定时、定点地运送至肿瘤细胞内部。本论文主要研究内容包括:1.由于传统穿膜肽Tat缺乏特异性,极易对正常组织造成巨大的毒副作用,所以,我们在Tat两端分别添加了一条长链PEG与两个赖氨酸(KK),设计了一条连接PEG的Tat-KK穿膜肽序列(PEG-Tat-KK),并将该序列嫁接到了树状多聚赖氨酸(DGL)上。之后,利用2,3-二甲基马来酸酐(DMA)对PEG-Tat-KK进行修饰,合成了一种pH敏感的细胞内在化纳米颗粒(DGL-PEG-Tat-KK-DMA),用作DOX的肿瘤靶向传送载体。其中,DGL作为纳米颗粒的骨架,PEG-Tat-KK介导纳米颗粒的穿膜,DMA则作为纳米颗粒的可逆阻断剂发挥着最为重要的作用。DMA可将Tat序列(YGRKKRRQRRR)内部的赖氨酸以及末端添加的两个赖氨酸(KK)酰胺化,该酰胺化不仅可以阻断Tat的非特异性穿膜,还可赋予该纳米药载一个负电性的外壳,两者综合可明显提高纳米药载的靶向性。在肿瘤的酸性环境下,DMA的迅速脱落又可及时恢复Tat的穿膜活性以及纳米药载表面的正电荷,诱导纳米药载进入肿瘤细胞内部,实现药物的胞内靶向传送。2.在模拟的生理环境下,该纳米药载呈规则球形,粒径约为~120 nm-140 nm,符合体内使用的理想粒径要求。通过对纳米药载的药物上载特性和载药纳米颗粒的药物释放行为考察,发现该载体不仅具有较高的药物上载率(74.6%),还展现了良好的pH敏感释放性能,从而避免了药物在运送过程中的过早释放,降低了毒副作用。另外,该纳米药载在不同pH条件下Zeta电位以及细胞摄入量的改变,说明pH敏感的酰胺键的设计可以有效地控制纳米颗粒表面电荷的转换以及Tat的穿膜活性,提高纳米颗粒的靶向性。动物体内分布以及抗肿瘤活性研究,则进一步表明了电荷转换以及可控穿膜的双重靶向显著地提高了纳米药载的特异性,从而使得该纳米药载将更多的药物运送到了肿瘤部位,有效地抑制了肿瘤生长。以上研究表明,该纳米药载不仅具有优良的物理化学特性,还兼具电荷转换以及可控穿膜的双重靶向性能,并且可在靶向基础上进一步实现药物的细胞内在化,最大程度地提高药物利用度。因此,该纳米药载是一种高效的肿瘤靶向药物载体,在肿瘤的靶向治疗上具有极大的应用潜力。