【摘 要】
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本试验采用大鼠C6胶质瘤细胞为工作模型,研究槲皮素对肿瘤细胞增殖抑制、凋亡诱导作用以及调控机制。按槲皮素浓度分成50μmol·L-1,75μmol·L-1及100μmol·L-1 3个处理组
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本试验采用大鼠C6胶质瘤细胞为工作模型,研究槲皮素对肿瘤细胞增殖抑制、凋亡诱导作用以及调控机制。按槲皮素浓度分成50μmol·L-1,75μmol·L-1及100μmol·L-1 3个处理组和空白对照组(生理盐水)溶剂对照组(二甲亚枫)及2%榄香烯阳性对照组,分别在加药后培养24h、48h、72h时,大鼠C6胶质瘤细胞在RPMI培养基中生长达1×106/ml后,在96孔板中分别加入上述浓度的槲皮素继续培养,每组设3复孔,作用24、48及72小时后,采用MTT比色法检测槲皮素对大鼠脑C6胶质瘤细胞增殖抑制情况,流式细胞术对槲皮素作用48小时的大鼠脑C6胶质瘤细胞进行周期分析,采用TUNEL法行原位凋亡检测经50μmol·L-1和100μmol·L-1分别作用48小时的大鼠C6胶质瘤细胞爬片,免疫组化法检测50μmol·L-1和100μmol·L-1的槲皮素作用48小时的Bcl-2,P53,PCNA基因产物。结果显示与空白对照组比较,槲皮素处理组随药物浓度的增加和作用时间的延长,A值减小(P<0.05),对C6细胞的增殖抑制作用增强,使停滞在G0/G1期的细胞增加(P<0.01),而S期和G2/M期细胞减少(P<0.05),与对照组相比凋亡细胞数增多。P53表达增加和PCNA蛋白、Bcl-2蛋白表达减少。因此槲皮素能抑制C6细胞的增殖,使细胞阻滞于G0/G1期,对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用具有时间、剂量依赖性,槲皮素能诱导C6细胞凋亡,凋亡诱导作用可能主要与槲皮素增强凋亡效应分子P53,下调Bcl-2、PCNA蛋白表达有关。上述结果为槲皮素作为胶质瘤辅助化疗药物的进一步研究及临床应用提供新的理论依据。
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