神经干细胞(neural stem cells, NSCs)是指分布于神经系统的、具有自我更新和多分化潜能的干细胞,其在特定的条件下能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。自从神经干细胞的自身分裂增殖和多分化潜能被人们认识后,人们就对其在中枢神经系统损伤和退行性疾病这样非常棘手的疾病中可能发挥的治疗作用充满了希望。由于神经干细胞的重大应用前景,研究神经干细胞新的表面标志物以及调控神经干细胞自我更新、增殖及分化的相关蛋白具有重要的临床意义和研究价值。糖基化是蛋白质的重要翻译后修饰之一,糖基化修饰对蛋白质的结构和功能都有着重要的影响。研究发现,神经干细胞的增殖和分化都受到信号通路的严格精密的调控,其中糖蛋白在信号通路调控过程中均发挥着重要生理作用,因此通过定量糖蛋白质组学技术大规模、高通量的研究神经干细胞增殖及分化过程中糖蛋白质的表达差异以及糖基化修饰程度的变化等,将有助于我们发现新的神经干细胞细胞表面标志性分子以及和干细胞增殖分化相关的关键糖蛋白,从而加深我们对神经干细胞增殖及分化的生理机制方面的了解。本实验目的是研究C17.2神经干细胞向星形胶质细胞分化过程中糖蛋白的变化。C17.2神经干细胞具有永生化、多潜能及可被体内跟踪等特性,是目前体外研究神经干细胞的良好载体。我们运用细胞培养稳定同位素标记(SILAC)技术结合凝集素亲和法和肼化学反应法对C17.2神经干细胞经AICAR刺激后向星形胶质细胞分化进行了定量糖蛋白质组分析。通过质谱分析,我们共鉴定到了123个非冗余糖基化修饰蛋白,其中57个糖蛋白具有相对定量信息,其中有16个细胞质膜糖蛋白在神经干细胞向星形胶质细胞分化过程中表现出了显著差异。这些糖蛋白在细胞黏附、细胞增殖、细胞分化以及神经系统发育过程中都发挥着重要生理作用。我们的研究不仅丰富了神经干细胞糖蛋白质数据,而且为发现新的神经细胞表面标志物以及研究神经干细胞增殖、定向分化以和神经系统疾病治疗等提供重要的理论基础。