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目的:采用随机对照试验评估苓桂术甘汤（LGZGD）治疗非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）脾阳虚证的疗效和安全性;并结合基因甲基化和游离脂肪酸代谢,探索LGZGD干预NAFLD脾阳虚证的潜在调控机制。方法:本研究自2018年07月至2019年03月在上海张江社区卫生服务中心、北蔡社区卫生服务中心、三林社区卫生服务中心3家社区卫生服务中心进行。这是一项多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照临床试验,共纳入243例NAFLD脾阳虚证受试者,以1:1:1的比例随机分配到苓桂术甘汤标准剂量（SLGD）组、苓桂术甘汤低剂量（LLGD）组和安慰剂组,评估LGZGD治疗NAFLD脾阳虚证的疗效和安全性。基于临床试验结果,筛选肥胖型NAFLD脾阳虚证（FNAFLD）受试者10例,收集基线（0周）全血;痩型NAFLD脾阳虚证（LNAFLD）受试者10例,收集基线（0周）全血和血清;痩型NAFLD脾阳虚证治疗无效（ILNAFLD）和治疗有效（ELNAFLD）受试者各10例,收集治疗后（12周）全血和血清,分别进行基因甲基化和游离脂肪酸检测,运用单元统计和多元统计方法,分别筛选出差异甲基化基因和差异脂肪酸代谢产物。结果:1.经过12周LGZGD治疗后,组内自身比较,根据意向性分析（ITT分析）及遵循研究方案分析（PP分析）,安慰剂组、LLGD组和SLGD组受试者的平均稳态模型评估的胰岛素抵抗指数水平（HOMA-IR）较基线均无显著变化（P＞0.05）;组间比较,ITT及PP分析均显示,治疗前后SLGD组、LLGD组和安慰剂组平均HOMA-IR水平差异无统计学意义（P＞0.05）。肥胖型NAFLD脾阳虚证受试者（BMI≥24kg/m2）中,ITT分析及PP分析均显示,与安慰剂相比较,LLGD组能显著降低HOMA-IR水平（ITT分析:-0.19±1.47 VS 0.08±1.99,P=0.038,PP分析:-0.34±1.21 VS 0.31±1.33,P=0.007）,SLGD组HOMA-IR变化无统计学意义（P＞0.05）。痩型NAFLD脾阳虚证受试者（BMI＜24kg/m2）中,ITT分析及PP分析均显示,三组间平均HOMA-IR水平变化差异无统计学意义（P＞0.05）。经12周治疗后,组内自身比较,ITT分析以及PP分析显示,三组受试者中医证候积分均明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）,组间比较,ITT分析和PP分析均显示,与安慰剂相比,LLGD组和SLGD组中医证候积分平均下降趋势差异有统计学意义（P＜0.05）。2.在LNAFLD和FNAFLD受试者中,发现存在1077个差异甲基化基因。对LNAFLD、FNAFLD、ELNAFLD、ILNAFLD这4组受试者的差异甲基化基因进行组间比较,共发现有19个差异甲基化基因,结合疾病靶点分析最终聚焦到ARF1、GBE1、KCNQ1、PITX2、PPP1R3A、ZNF536这6个差异甲基化基因可能在LGZGD改善肥胖型NAFLD脾阳虚证受试者的胰岛素抵抗（IR）方面起到关键作用。3.LNAFLD、ILNAFLD、ELNAFLD三组受试者血清进行游离脂肪酸检测,共发现17种游离脂肪酸,分别为癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、油酸、亚油酸、硬脂酸、棕榈酸、棕榈油酸、十五烷酸、十七烷酸、γ-亚麻酸、α-亚麻酸、花生酸、顺式-8,11,14-二十碳三烯酸、花生四烯酸、顺式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸、顺式-4,7,10,13,16,19-二十碳六烯酸。T检验提示,发现癸酸代谢在ILNAFLD组中没有变化,而在ELNAFLD组中显著增加（P＞0.05）。结论:1.在总体人群中,苓桂术甘汤仅可以显著改善NAFLD脾阳虚证受试者的中医证候,但是未能改善受试者的IR;在肥胖型NAFLD脾阳虚证受试者中发现,低剂量苓桂术甘汤治疗可以改善受试者IR,以及脾阳虚证证候。2.在NAFLD脾阳虚证受试者肥胖型和痩型人群中存在多个差异甲基化基因,ARF1、GBE1、KCNQ1、PITX2、PPP1R3A、ZNF536这6个差异甲基化基因可能在LGZGD改善肥胖型NAFLD脾阳虚证受试者的IR方面起到关键作用。3.在痩型NAFLD脾阳虚证受试者中,发现痩型干预无效受试者癸酸代谢未响应苓桂术甘汤的干预,癸酸代谢可能是导致痩型无效的原因。