【摘 要】
:
目的: 构建癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)与热休克蛋白70(heat shock proteins, HSP70)的真核双表达质粒,以其免疫小鼠,观察其诱导的细胞免疫应答情况,以探求预防
论文部分内容阅读
目的: 构建癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)与热休克蛋白70(heat shock proteins, HSP70)的真核双表达质粒,以其免疫小鼠,观察其诱导的细胞免疫应答情况,以探求预防和治疗结肠癌术后复发的新策略。方法:采用RT-PCR 方法克隆CEA 及HSP70 cDNA 序列,并利用酶切、连接等手段将CEA 及HSP70 定向克隆至真核双表达质粒中pIRES。用脂质体法将质粒pIRES、pIRES-CEA 、pIRES-HSP70、pIRES-CEA-HSP70 转染CHO 细胞,G418 筛选阳性转染细胞,ELISA法检测CEA 表达。将上述四种质粒作为核酸疫苗免疫小鼠,MTT 比色法检测小鼠脾淋巴细胞对结肠癌细胞CW-2 的细胞杀伤效应。结果:经酶切鉴定、PCR 鉴定与序列测定, 证实真核双表达载体pIRES-CEA-HSP70 构建成功。转染pIRES、pIRES-CEA 、pIRES-HSP70、pIRES-CEA-HSP70 的细胞CEA 表达分别为0.00ug/L、8.75±0.82 ug/L、0.00ug/L、6.86±0.62 ug/L.。pIRES-CEA-HSP70 免疫组的细胞杀伤率在效靶比50:1、25:1、12.5:1、6.25:1 下分别为35.425±3.877%、26.875±3.171%、20.325±1.916%、15.550±0.759%,均明显高于其余三组,差别有显著性意义(p<0.01)。pIRES、pIRES-CEA 、pIRES –HSP70 组杀伤率差别无显著性(p>0.05)。结论: 核酸疫苗pIRES-CEA-HSP70 可诱导机体产生特异性细胞免疫应答,为其用于结肠癌的治疗提供实验基础。
其他文献
以司法权监督制约行政权,将行政主体的行政行为纳入法院司法审查范围是现代法治国家的通常做法。然而在我国,由于各方面原因,监督行政权行使的司法审查制度建立较晚,而且司法
所谓个别人,是指由于主客观因素的影响,存在发生各种违法犯罪问题或事故的可能,在一段或较长时期内需重点帮助、教育和防范的人员。这类人员虽属少数,但令各级领导关注,让班排骨十
随着供给侧改革这一国民经济发展战略的提出,制造业的发展再次引起全社会的关注。如何确保我国制造业实现升级,为国民经济发展创造更多的收益,关键在于国内各大院校能否为企
用不同浓度的水杨酸(SA)处理红花种子和植株,就种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、胚根长、胚芽长和植株高度、叶片叶绿素(SPAD)含量、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛
【目的】探讨幽门螺杆菌(Hp)oipA DNA 疫苗在抗螺旋形与球形Hp 感染中的作用及其机制。【方法】抽提并纯化在体外成功表达OipA 的重组质粒pcDNA3.1-oipA 及pcDNA3.1,以金粉包
随着现代生活水平的提高,人们除了对电影或文艺演出等舞台艺术的质量要求提高外,对观赏环境也提出了很高要求。观众厅和舞台是影剧院建筑的主体,是人员集中的场所,是空调系统
随着高清、3D等技术的成熟与普及,以互联网电视为代表的流媒体业务成为互联网流量的主要组成部分。互联网电视作为“互联网+”时代重要的流媒体应用,由于内容丰富和使用方便,
第三代移动通信系统(3G:The Third Generation Mobile Communication System)要求能够提供高比特速率业务,以便传输和接收高质量的图像、视频等多媒体信息。从理论上讲,频分
本文从我国工业化、城市化、国际化加快推进的发展背景出发,从供给与需求两方面梳理农产品价格上涨的因素,构建了农产品价格变动的计量模型,对导致农产品价格上涨的趋势性因
2004年1月12日,刚刚过完94岁生日的斯霞老师在南京鼓楼医院辞世,永远离开了她眷恋的讲台,离开了她挚爱的学生。这位在普通小学教师岗位上工作了70多年的一代名师,用一个“爱