血管紧张素转化酶是一种构成血管内皮细胞的与膜结合的糖蛋白，也以循环形式存在于体液中。ACE是催化血管紧张素Ⅰ的C-末端的组氨酸-L-亮氨酸产生8肽的血管紧张素Ⅱ的酶，同时它也在缓激肽的分解代谢中起关键性作用。因此ACE是肾素-血管紧张素-醛固酮系统和缓激肽系统的关键酶，对于ACE活性以及基因多态性的研究已成为国内外研究的热点之一。 目的：近年来关于ACE活性的研究层出不穷：一方面，ACE地检测方法不断改进；另一方面，不同疾病血清ACE活性的监测。ACE的研究已上升到基因的水平，ACE基因位于17q23上，由26个外显子和25个内含子组成，全长21Kb。在第16内含子中有一段287bp的相当于Alu重复序列的插入／缺失多态性，含有此片段的PCR产物长度为490bp，称为插入型等位基因(Ⅰ型)；没有此序列的PCR产物长度为190bp，称为缺失型等位基因(D型)，从而产生了3种不同的基因型，即DD、DI、Ⅱ型。此基因多态性成为ACE基因的I／D多态性。本研究的目的是探讨ACE活性、基因多态性和疾病三者之间的关系，从而说明在临床上检测ACE活性和基因多肽性是否可以辅助临床的诊断和治疗。 方法：本研究主要针对的疾病是代表微血管病变的糖尿病肾病和大血管病变的脑卒中这两种中老年多发病，确定基本诊断标准后随机选取住院和门诊病人；以年龄相匹配的健康查体者为对照组。取空腹静脉血提取DNA，通过PCR方法扩增出目的基因的片段，经过电泳，EB染色后，观察ACE基因多态性并记录结果。同时测定血清ACE活性，记录相关临床资料。 结果：1)在糖尿病肾病的方面：糖尿病肾病患者ACE基因的DD基因型频率高于对照组(x~2=8.052，P=0.005)，与糖尿病无肾病者的差天津医科大学硕士研究生论文摘要别有统计学意义。’肾病组进一步分为透析和非透析组，比较两组的基因型和等位基因频率差别无统计学意义。以不同基因型分组比较临床资料发现DD基因型的ACE活性最高，11基因型最低，Dl基因型居中。糖尿病肾病组ACE活性高于对照组。 2)脑卒中方面:健康组、脑梗死组和脑出血组的基因型分布有差别(xZ=13.87，P二0.008)。脑梗死组和脑出血组的DD基因型频率高于对照组的相应频率(xZ=9.21，P一0.002;xZ=5.76，P一0.003);脑梗死和脑出血组的D等位基因频率高于健康组(xZ一14.23，P<0.005) 分别比较健康对照组、原发性高血压组、脑梗死合并高血压组、脑出血合并高血压组患者ACE基因型和等位基因频率发现，脑梗死合并高血压组、脑出血合并高血压组患者的DD基因型和D等位基因频率均高于健康组，差别有统计学意义;其它组间的基因型和等位基因分布无差别。 脑梗死和脑出血组血清ACE活性均与健康对照组无差别;健康组、高血压组、脑梗死合并高血压、脑出血合并高血压组ACE活性差别无统计学意义;脑卒中合并高血压组比血压正常组ACE活性的差别无统计学意义。 3)方法学方面。为避免ACE基因多态性中Dl误识别为DD，导致DD基因型频率的假性升高，分别采取PCR反应体系中加入5%DMSO或用特异引物对所有DD基因型标本进行2次扩增两种方法，并与常规方法 比较可见常规方法识别的DD基因型频率高于其它两种方法，但两种方法 识别的差别无统计学意义。 结论:1)糖尿病肾病患者ACE基因的DD基因型和D等位基因频 率高于对照组，说明ACEI/D多态性是糖尿病肾病的易感基因。糖尿病肾 病患者的血清ACE活性高于对照组，检测ACE活性有利于糖·尿病肾病的 诊断和治疗。 2)推断脑卒中与DD基因型和D等位基因有一定相关性，ACE基 因UD多态性可能是脑卒中的遗传危险因素。天津医科大学硕士研究生论文摘要 3)不同基因型ACE活性由高至低的顺序为DD、Dl、11，说明其活性受到ACE基因多态性的调控。 4)常规方法鉴别的ACE基因多态性可能出现DD基因型频率假性升高，可采取PCR反应体系加入5%DMSO或用特异引物对所有DD基因型标本进行2次扩增两种方法，尽量避免实验方法导致的误差。