论文部分内容阅读
榉树(Zelkovaschneideriana)为国家二级重点野生保护植物,是一种珍贵的用材树种,具有重要的开发利用价值。近年来,榉树天然资源遭到严重破坏以致濒危。遗传多样性的保护是生物多样性保护的基础,只有了解了榉树种群遗传多样性,才能建立合理的生物多样性的保护策略,因此榉树遗传结构的研究对榉树资源的保护具有重要的意义。本研究以云南邱北、易门、师宗、双柏和浙江平湖5个种群的榉树为对象,利用ISSR(InterSimpleSequenceRepeat)分子标记技术对各种群遗传多样性和遗传结构进行了分析,其主要研究方法和结果如下:
1.采用CTAB法提取了榉树基因组DNA,所提取的DNA的质量较高,经检测适于ISSR扩增反应。
2.建立了适于榉树ISSR扩增的最佳反应体系:总体积25μl,DNA模板20ng,10×buffer2.5μl,primer0.40μM,dNTPs0.25mM,TaqDNA聚合酶0.75U,MgCl21.8mM。扩增反应的程序为:预变性,94℃5min;变性,94℃30s;退火,50℃45s;延伸,72℃2min,45个循环;72℃延伸7min,4℃保存。
3.采用ISSR分子标记对云南邱北、易门、师宗、双柏和浙江平湖5个种群(每种群19个样本)的榉树进行了遗传多样性和遗传结构研究。18条ISSR引物扩增得到216个清晰的条带,其中多态性条带215个,多态性条带百分率(PPB)为99.54%。POPGENE(Version1.32)软件分析结果表明,邱北种群的遗传多样性水平最高(PPB=88.43%,0.2605,Ho=0.4014),其次是易门种群(PPB=86.11%,HE=0.2425,Ho=0.3759),师宗、双柏、平湖三个种群的多样性水平相差较小。种群的遗传结构分析表明,总的遗传变异中有80.28%的存在于种群内,而各种群间的遗传变异则占总变异的为19.72%。UPGMA聚类分析可知,易门和师宗种群的亲缘关系最近,先聚合在一起,然后再依次与邱北、双柏聚类,最后与平湖种群聚合。
4.对榉树种群的遗传多样性及遗传结构进行了分析,探讨了榉树致濒的原因。提出了就地保护、迁地保护和造林繁育的保护策略。