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茶树,一种多年生常绿植物,喜温喜湿,是我国主要的经济作物之一。干旱胁迫影响植物的生长、发育与品质,严重时会对植物产生不可逆的伤害甚至会造成死亡。旱害,对于茶叶产量和品质等经济效益有很大的影响。我国茶区降水多集中在夏季,秋冬两季降水量少,常发生旱害;夏季虽降水丰富,但气温高、光照强、水分蒸发和蒸腾量大,也常出现干旱的情况。旱害频发,严重威胁到茶叶品质和茶产业发展。在此次情况下,培育茶树抗旱品种意义重大。如何更好的解除干旱胁迫状态,使茶树快速恢复生长尤为重要。蛋白激酶CsSnRK2s是改良植物耐受性的重要候选基因,也是ABA信号转导途径中的核心组成成分,目前茶树中对于蛋白激酶CsSnRK2s的研究较少。本文以茶树品种‘舒茶早’为实验材料,设置了 3个梯度的水分胁迫,随后以漫灌、喷灌和滴灌的方式对干旱胁迫的茶树进行复水处理,通过研究旱后复水的成活率、渗透势、脂膜相对透性、气孔开度等生理指标,分析不同复水方式对干旱胁迫下茶苗恢复的影响。克隆了 CsSnRK2家族的基因,研究了在自然干旱、PEG处理、ABA诱导及重度干旱胁迫下复水过程中的基因表达量,进一步探究CsSnRK2s在茶树非生物胁迫中所起的作用。主要研究结果如下:(1)复水处理方式对不同干旱胁迫下茶苗恢复的影响:在轻度和中度干旱胁迫下,茶苗成活率滴灌>喷灌>漫灌;在重度干旱胁迫下,茶苗成活率喷灌>滴灌>漫灌。所以,在茶苗未受到重度干旱胁迫时,以滴灌作为复水方式更为合理。(2)重度干旱胁迫下,以喷灌为的复水方式的前2 h渗透势上升最快,相对电导率和丙二醛含量下降程度最大,说明前期喷灌有利于茶树恢复。采用喷灌与滴灌相结合的方式来解除茶树重度干旱胁迫较优,前期以喷灌的方式提供给茶苗足够的水分,改善茶园小气候;后期以滴灌的方式复水能有效缓解茶树干旱胁迫,同时有利于田间节约用水。(3)利用茶树基因组CSS数据库,克隆出CsSnRK2s家族中6条基因:CsSnRK2.4、CsSnRK2.10、CsSnRK2.8、CsSnRK2.6-like1、CsSnRK2.6-like2 和 CsSnRK2.2。根据系统发育树和对ABA的响应,将其分成3个亚类,并对它们的基因结构进行分析。结果表明除了 CsSnRK2.6-like1有3个外显子以外,其它成员均含有9个外显子。6条基因ORF框大小从1035 bp至1092 bp不等。编码的氨基酸序列的长度从344(CsSnRK2.8)到363(CsSnRK2.6-like2)个氨基酸(aa)。预测的蛋白分子量从38.79(CsSnRK2.8)到 41.19(CsSnRK2.10)kDa,理论等电点(pI)为 4.74(CsSnRK2.2)到 5.90(CsSnRK2.4),利用NetPhos 3.1Server预测其磷酸化位点显示,6条基因均具有较多的磷酸化位点。(4)对茶树蛋白激酶SnRK2s器官表达特异性和在非生物胁迫下表达模式进行分析得到CsSnRK2s在茶树中具有器官表达特异性。CsSnRK2.2、CsSnRK2.6-like1、CsSnRK2.6-like2和CsSnRK2.10在根中表达量较高,CsSnRK2.4在芽中表达量最高,CsSnRK2.8在叶中表达量最高。CsSnRK2s对PEG胁迫有响应,但是6条基因响应的程度有所不同。(5)在干旱胁迫下茶树复水过程中,CsSnRK2.6-like2、CsSnRK2.6-like1和CsSnRK2.4在复水12 h和复水1 d时表达量有明显的降低。其中CsSnRK2.6-like2、CsSnRK2.6-like1属于第三亚族,其降低的原因可能是由于在复水12 h和复水1 d时,茶树体内ABA含量下降,PP2C通过去磷酸化抑制了SnRK2s的活性。属于第一亚族的CsSnRK2.4表达量也在12 h处下降,因此,推测CsSnRK2.4表达量的下调,是导致茶树体内渗透势上升的原因之一。不同复水方式处理对茶树干旱胁迫解除在CsSnRK2s基因表达量上没有明显差异。