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目的:随着雷公藤药材在临床上应用越来越广泛,同时在市场上也存在较多的伪品,传统方法已不能完全鉴定其真伪和质量评价。因此,需建立准确、简单快速的雷公藤质量评价方法,对实现其质量现场快速筛查,保证临床用药安全有效具有的重要意义。而免疫检测技术具有操作简单快速、低成本、高通量等优势,是一种新型的中药质量控制技术。基于部颁标准中规定雷公藤甲素是控制雷公藤质量的指标性成分,本文通过单克隆抗体制备的技术、酶联免疫技术和胶体金免疫层析技术,制备了雷公藤甲素单克隆抗体并初步建立了雷公藤甲素免疫检测方法,可实现对雷公藤药材及制剂质量现场快速评价,并通过DNA条形码法和化学分析法进行验证,为部颁标准方法进行补充。方法:（1）将雷公藤甲素（triptolide,TP）的14位羟基进行结构修饰得到半抗原mTP,采用活化酯法合成雷公藤甲素抗原。通过紫外扫描法、TNBS法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）法鉴定抗原偶联结果。抗原多次免疫Balb/c小鼠后,取小鼠血清进行抑制和阳性检测,选择效价高、特异性好的小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合。利用单克隆抗体制备技术筛选针对雷公藤甲素结构的特异性单克隆细胞株,小鼠体内诱生腹水,用饱和硫酸铵法纯化腹水得到抗体,并对抗体性能进行评价。（2）用所制备的抗原和雷公藤甲素单克隆抗体为基础,建立雷公藤甲素的间接酶联免疫检测方法（icELISA）,实现对雷公藤药材及制剂中的雷公藤甲素含量进行快速检测。（3）利用胶体金标记雷公藤甲素抗体,制备雷公藤甲素胶体金免疫层析试纸条。对胶体金制备试纸条的流程进行优化及其性能进行评价。对雷公藤样品中的雷公藤甲素进行检测,实现雷公藤药材及制剂真伪质量的现场快速鉴定。并用超快速液相-串联质谱法（UFLC-ESI-MS/MS）法验证胶体金免疫层析法对样品的检测结果。（4）基于DNA条形码和化学仪器方法对雷公藤属药材进行鉴定及质量评价。结果:（1）通过紫外扫描法、TNBS和MALDI-TOF-MS证实偶联成功,其mTP-BSA和mTP-OVA偶联比分别为18:1和7:1。通过细胞融合、筛选与克隆技术,获得了高特异的雷公藤甲素单克隆细胞株mAb 2D10 1H8。空白溶剂中,该抗体对TP的IC50为0.28μg/mL,效价约为2.56×105。亲和力常数为2×107 L/mol。雷公藤甲素抗体类型为IgGl型。与雷公藤内酯酮、雷酚内酯、雷公藤福定、雷公藤红素交叉反应率分别为48.57%、20.47%、3.27%、1.15%,对雷公藤内酯甲、雷公藤福定、去甲泽拉木醛交叉反应率均小于1.0%。（2）采用“棋盘格法”,确定了雷公藤甲素抗原抗体的最佳工作浓度分别为0.016μg/mL和0.032μg/mL。在此基础上建立了ic ELISA法,雷公藤甲素的IC50值为0.28μg/mL,最低检测极限为0.3ng/mL,最佳检测范围(IC20IC80)为0.090.87μg/mL。添加回收率为90.05106.6%。利用建立的icELISA检测方法测定38批样品中的雷公藤甲素含量,其检测结果与UFLC-ESI-MS/MS法检测的结果基本一致。（3）基于胶体金标记抗体技术,制备了雷公藤甲素胶体金免疫检测试纸条,检测线包被抗原浓度mTP-BSA 0.3 mg/mL;控制线羊抗鼠IgG最佳浓度0.5 mg/mL;金标抗体的最佳量为40μg;胶体金标记抗体的pH值为8.0;试纸条对甲醇浓度耐受性小于30%;雷公藤甲素试纸条的检测限为1μg/mL,雷公藤甲素试纸条对雷公藤内酯酮的交叉反应高,对雷酚内酯、雷公藤福定、雷公藤红素、雷公藤内酯甲、去甲泽拉木醛、冬凌草甲素无交叉反应。参考部颁标准及文献限量规定,66批样品（雷公藤根及制剂）用所制备的雷公藤甲素试纸条进行检测。结果有38批样品溶液滴在试纸条上未消线,即伪品或者雷公藤甲素含量低。用UFLC-ESI-MS/MS方法进行验证,结果同试纸条测得结果一致。（4）在NJ聚类树上雷公藤药材及其混伪品聚类较为清晰,初步分析27份样品中有12种为雷公藤正品。化学指纹谱研究表明特征1区可以较为直观的区分雷公藤伪品;UFLC-ESI-MS/MS,HCA-热图分析表明不同产地雷公藤药材6种有效成分的含量差异显著,可评价雷公藤药材的质量。结论:制备了特异性强的雷公藤甲素单克隆抗体;建立的icELISA检测方法具有检测快速、灵敏度高、成本低、特异性强等优点,适合雷公藤药材及制剂中雷公藤甲素含量快速检测;建立的雷公藤甲素胶体金免疫检测试纸条,具有检测快速、成本低、结果可视化、便于携带等优点,在雷公藤中药材及制剂现场快速检测方面应用前景广阔。