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目的:检测原发性肾病综合征(INS)患儿不同时间点外周血单个核细胞(PBMC)多药耐药基因(MDR1)及其糖蛋白170(P-gp170)的表达情况,探讨激素耐药型肾病综合征(SRNS)患儿加用他克莫司(TAC)治疗后其MDR1及其P-gp170表达的变化和临床意义。方法:选择本院住院的原发性肾病综合征(INS)患儿36例为研究对象,根据激素治疗效果分成两组:激素敏感型肾病综合征(SSNS)组20例和激素耐药型肾病综合征(SRNS)组16例;20名健康体检儿童作为正常对照组(control)。分四个时间点采集外周血标本:(1)发病初未用糖皮质激素(GC)时;(2)足量GC治疗4周后;(3)SSNS组的GC减量4周后或SRNS组的加用TAC治疗4周后;(4)SRNS组的加用TAC治疗8周后。进行如下实验:①实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测SRNS和SSNS不同时间点PBMC MDR1m RNA的表达。②流式细胞仪(FCM)检测SRNS和SSNS不同时间点PBMC中淋巴细胞(Lymphocytes)上P-gp170的表达百分数。③16例SRNS患儿均在激素治疗4周后行肾穿刺活检术,10例正常肾组织为正常肾组织对照组,用免疫组织化学方法(IHC)检测肾组织中P-gp170的表达。结果:(1)INS患儿PBMC MDR1m RNA与Lymphocytes P-gp170的表达呈高度正相关(r=0.854,P<0.01)。(2)GC治疗前,INS患儿PBMC MDR1m RNA与Lymphocytes P-gp170表达量均高于Control组,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)足量GC治疗4周后,SSNS组和SRNS组患儿PBMC MDR1m RNA及Lymphocytes P-gp170的表达均较治疗前明显升高,差异均具统计学意义(P<0.01)。(4)GC减量4周后,SSNS患儿MDR1m RNA及Lymphocytes P-gp170的表达较前明显回落,差异均具统计学意义(P<0.01),而与GC治疗前无明显差异性(P>0.05)。(5)加用TAC治疗4、8周后,SRNS组患儿PBMC MDR1m RNA及Lymphocytes P-gp170的表达均较前明显回落(P<0.01),而加用TAC治疗4周后的SRNS患儿两指标的表达量明显高于GC减量4周后的SSNS患儿(P<0.01)。(6)在SRNS组中,TAC治疗8周后PBMC MDR1m RNA及Lymphocytes P-gp170的表达量明显低于4周后(P<0.01),且与GC治疗前相比,无明显统计学差异(P>0.05)。(7)SRNS患儿与正常肾组织对照组儿童肾组织中P-gp170主要表达于肾小管及肾间质,SRNS组肾组织近曲小管和远曲小管的P-gp170阳性率表达均明显高于正常肾组织对照组(P<0.01),SRNS组内近曲小管P-gp170阳性率表达明显高于远曲小管(P<0.01)。(8)足量GC治疗4周后,SRNS患儿Lymphocytes P-gp170的表达量与肾组织近曲小管及远曲小管P-gp170的表达量均呈正相关(r=0.547,P<0.05;r=0.541,P<0.05)。(9)GC治疗前,SRNS组患儿PBMC P-gp170的表达量与24小时尿蛋白定量正相关(r=0.712,P<0.01)。结论:(1)原发性肾病综合征患儿PBMC MDR1m RNA与Lymphocytes P-gp170的表达呈高度正相关,即MDR1m RNA表达量越高,其蛋白产物P-gp170表达量越高;(2)激素耐药型肾病综合征(SRNS)患儿PBMC MDR1m RNA及其蛋白产物P-gp170的高表达可能参与了激素耐药的发生和发展;(3)SRNS患儿的肾组织P-gp170的高表达可能与激素耐药有关。(4)他克莫司可在一定程度上减少SRNS患儿PBMC MDR1m RNA与P-gp170的表达量,可能为逆转肾病综合征患儿激素耐药的机制之一。