目的：妊娠期糖尿病是围产期常见并发症之一,是指妇女在妊娠期间合并糖尿病症状。近年来妊娠期糖尿病的全球患病率正在逐年增长,越来越受到广泛的关注。流行病学调查和动物实验证明,妊娠期糖尿病可引起各种胚胎发育畸形,其中眼睛发育畸形十分严重。但是,其发生机理至今尚不清楚。目前,针对妊娠期糖尿病的治疗,尚无特别好的措施。主要还是利用降糖药物进行降糖治疗,如胰岛素等,都有一定的副作用。因此寻找有效的防治药物显得尤为重要。本研究在课题组前期建立的高糖鸡胚眼发育畸形的模型基础上,进一步研究高糖环境造成鸡胚眼睛发育畸形的机制,并利用该模型评价了原花青素的干预作用。本课题旨在揭示妊娠糖尿病造成胚胎眼睛发育畸形的损伤机制,并且为开发安全有效的孕期畸形发生的防治药物,提高妊娠质量及预防不良妊娠结果提供有益的科学依据。方法：根据前期试验结果,建立高糖诱导鸡胚眼睛发育畸形模型,根据眼睛发育相关调控基因,用荧光定量PCR的方法筛选出损伤最严重的基因。构建Pax6质粒转染进入鸡胚内验证,检测鸡胚死亡率、眼睛畸形率、眼睛中Pax6基因和蛋白表达水平、Otx2和Six3基因表达水平。研究原花青素的保护作用：将受精鸡蛋随机分为正常对照组(0.72%生理盐水)、模型组(Glucose 0.2 mmol/egg)、原花青素低、高剂量组(1 nmol/egg和10 nmol/egg)、依达拉奉组(0.1 nmol/egg),共五组进行实验。原花青素和依达拉奉分别于第0天注射入气室,葡萄糖于第1天注射入气室(原花青素组和依达拉奉组均给予葡萄糖)。记录胚胎的死亡率、眼睛畸形发生率、体重、体节数。体视显微镜下观察各组胚胎形态。利用试剂盒测定胚胎眼睛中葡萄糖含量和氧化应激的水平。用荧光定量PCR测定GLUT1基因和Pax6基因水平。用Western blotting测定Pax6蛋白水平。结果：给予高糖后,造成鸡胚眼睛发育畸形。PCR结果显示鸡胚眼睛中Pax6基因受损最为严重。过表达Pax6后,鸡胚的死亡率和眼睛畸形率都明显下降,同时Otx2基因和Six3基因表达水平也恢复了。给予原花青素后,在高糖环境下,鸡胚死亡率及眼睛畸形率明显降低,体重及体节数回升,生长趋于正常,呈剂量依赖关系。原花青素并未影响胚胎眼睛中葡萄糖的水平和葡萄糖转运蛋白表达水平。和高糖组相比,原花青素干预下胚胎眼睛中Pax6基因和蛋白均回升。ROS和MDA水平降低,SOD和(GSHPx酶活性回升,氧化应激程度减轻。结论：本研究证实Pax6在高糖诱导的鸡胚眼睛发育畸形中的重要作用。首次发现原花青素对高糖诱导的鸡胚眼睛发育畸形具有保护作用,并从氧化应激角度解释其作用机制。为孕妇产前用药提供了初步的参照。