论文部分内容阅读
目的检测SOCS1在宫颈癌、癌前病变及宫颈癌细胞系中的表达情况,以探讨SOCS1与宫颈病变及HPV感染的关系及临床意义;向宫颈癌细胞系中转染表达SOCS1的重组质粒,使其高表达,观察其在宫颈癌细胞系中对细胞增殖及转移的调控作用,为SOCS1最终能否做为宫颈癌治疗的基因靶点提供理论依据。方法1.选取天津医科大学第二医院妇科阴道镜下多点活检病理组织学检查诊断为低级别上皮内瘤变(LSIL)36例,高级别上皮内瘤变(HSIL)30例,宫颈癌57例。选取因良性病变行子宫全切的正常宫颈上皮组织30例。2.应用RT-PCR和western blot等技术,检测SOCS1在宫颈癌、宫颈癌前病变及宫颈癌细胞系中的表达水平。3.向宫颈癌细胞系中转染表达SOCS1的重组质粒,利用MTT及细胞划痕实验,观察导入SOCS1重组质粒后宫颈癌细胞的增殖、转移情况。结果第一部分:SOCS1在宫颈病变组织中的表达及意义SOCS1 m RNA及蛋白在正常宫颈组织、低级别上皮内瘤变组织、高级别上皮内瘤变组织及宫颈癌组织中呈现不同的表达水平,宫颈癌组织中的m RNA及蛋白表达量显著低于正常宫颈组织、低级别上皮内瘤变组织及高级别上皮内瘤组织,差异具有统计学意义。高级别上皮内瘤变组织显著低于低级别上皮内瘤变组织及正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05),低级别上皮内瘤变组织与正常宫颈组织之间无显著差异(P>0.05)。第二部分:SOCS1对宫颈癌Hela细胞系的生物学行为的影响1.通过脂质体质粒转染的方式,将SOCS1(PC DNA3.1)质粒将SOCS1基因导入宫颈癌Hela细胞系中,成功使得SOCS1高表达,与转染空质粒组及未转染组对照,m RNA及蛋白表达均有显著增加(P<0.05)。2.转染后Hela细胞中的E7 m RNA及蛋白表达显著下降,与未转染组和空质粒对照组中表达相比有显著差异。3.与转染空质粒组及未转染组比较,转染SOCS1质粒组的宫颈癌细胞的在0-24小时内的增殖速度及转移能力无明显差异,而在转染培养后的48小时后,细胞的增殖速度及转移能力均显著下降。结论1.研究结果提示SOCS1的表达下降可能与宫颈癌的发生关系密切,随着宫颈病变进展,SOCS1表达下降。2.利用SOCS1表达的质粒载体转染宫颈癌Hela细胞系,证实其在抑制癌细胞增殖、转移方面有重要作用。3.SOCS1可能在宫颈癌的发生、发展及转移中具有重要的抑癌作用,可作、能成为宫颈癌基因治疗的有效靶点,具有潜在临床应用价值,为进一步研究宫颈癌的病情进展评估及基因治疗奠定理论基础。