强直性脊柱炎患者外周血单核细胞lncRNA与自噬相关基因的表达水平及相关性研究

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目的:分析强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)患者外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中lncRNA GAS5、lncRNA MEG3以及自噬相关基因LC3、Beclin1表达水平及相关性,探索lncRNA GAS5、lncRNA MEG3、LC3、Beclin1在AS发病及进展过程中的作用及意义。方法:研究采用病例对照设计,从2019年3月至2019年10月,共收集50例AS病例和50例健康对照。AS病例来自安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科专家门诊,对照来自安徽医科大学第一附属医院体检中心。病例和对照组分别采集5m L静脉血,病例同时完成《AS流行病学调查表》。使用荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)方法检测lncRNA GAS5、lncRNA MEG3以及自噬相关基因LC3,Beclin1在AS患者及健康对照PBMCs中的表达水平,用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血浆中细胞炎症因子IL-17及IL-23的水平。数据的录入使用Epi Data3.1软件;统计分析使用SPSS 23.0;统计图的制作使用Graph Pad Prism 7软件。符合正态分布的定量资料用均数±标准差()表示,采用t检验/方差分析进行分析;率的比较用χ2检验;不符合正态分布的资料用中位数和四分位数间距(Interquartile range,IQR)即M(P25,P75)表示,采用Mann-Whitney U非参数检验进行两组间的比较,两组以上的比较采用Kruskal Wallis H检验;相关性分析时,两组资料均符合正态分布的用Pearson相关,否则采用Spearman等级相关。检验水准α=0.05。结果:本研究共纳入了50例AS患者和50例健康对照。病例组中37名男性,13名女性,平均年龄33.53±9.43岁;对照组中40名男性,10名女性,平均年龄34.38±8.01岁;病例和对照在年龄(t=0.508,P=0.476)以及性别分布(χ2=0.485,P=0.476)上无统计学差异。病例组lncRNA GAS5的表达水平低于对照组,差异有统计学意义(Z=-4.846,P<0.001);AS病例组与对照组中lncRNA MEG3的表达水平无统计学差异(Z=-1.038,P=0.299)。病例组LC3、Beclin1的表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(Z=-4.736,P<0.001;Z=-2.999,P=0.003)。血浆中IL-17、IL-23的表达水平在AS病例组与对照组间无统计学差异(Z=-1.286,P=0.199;Z=-1.337,P=0.181)。AS患者lncRNA GAS5表达水平与LC3、Beclin1的表达水平呈正相关(rs=0.583,P<0.001;rs=0.290,P=0.041);lncRNA MEG3表达水平与LC3的表达水平呈正相关(rs=0.375,P=0.007),未发现lncRNA MEG3表达水平与Beclin1表达水平之间的相关性(rs=0.199,P=0.165)。AS患者Beclin1表达水平与IL-23表达水平呈正相关(rs=0.288,P=0.043)。AS患者lncRNA MEG3表达水平与病程之间存在负相关(rs=-0.297,P=0.036),其余各因子的表达水平与ESR、CRP、BASFI、BASDAI、病程之间的相关性分析未发现统计学关联(P>0.05)。结论:AS患者PBMCs中lncRNA GAS5、自噬相关基因LC3和Beclin1的表达水平降低,且AS患者lncRNA GAS5的表达水平与LC3及Beclin1的表达水平呈正相关,lncRNA MEG3表达水平与LC3的表达水平呈正相关,提示lncRNA GAS5及lncRNA MEG3可能是通过抑制AS患者的自噬水平,从而参与AS的发病和进展。
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