甲卡西酮在成瘾小鼠体内的代谢动力学研究

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目的:1.建立小鼠条件位置偏爱(conditioned place preference,CPP)动物模型。2.研究甲卡西酮及其代谢物在正常小鼠和成瘾小鼠体内的代谢动力学规律,探讨血液中甲卡西酮的检出时限。同时比较正常小鼠和成瘾小鼠给药后代谢动力学规律的异同。方法:1.小鼠CPP模型:实验小鼠分为四组:A,B,C和盐水对照组。其中A,B,C组分别按照6.65mg/kg,12.35mg/kg,19mg/kg腹腔注射。实验过程分三期:前测期(第1天),条件训练期(第2–9天)和测试期(第10天)。测试结束后,统计实验小鼠在伴药侧停留的时间计算CPP值(即测试与前测的时间差值)。实验结果用均值±标准误(mean±SEM)来表示,采用SPSS23.0统计软件进行数据分析,以P<0.05为显著性检验水准。2.正常小鼠给药后体内的代谢动力学:小鼠禁食不禁水12小时后,随机分成A,B,C和盐水对照组。其中A,B,C组分别按照6.65mg/kg,12.35mg/kg,19mg/kg腹腔注射含量为95%的甲卡西酮水溶液,在服药后的3min,15min,30min,1h,2h,3h,4h,6h,8h,10h,12h,24h,30h,内眦静脉丛采血200μL,-20℃冰箱保存待检。所得数据采用DAS3.2.8药代动力学软件进行代谢动力学分析;SPSS23.0统计软件,采用t检验和方差分析。3.成瘾小鼠给药后体内的代谢动力学:按照CPP实验所制定的分组,分为四组,A,B,C和盐水对照组。在CPP测试期结束后,通过统计分析得出A,B,C三组均诱导出明显的CPP效应。再次给药前确定小鼠体内已无甲卡西酮及其代谢物后,在服药后的3min,15min,30min,1h,2h,3h,4h,6h,8h,10h,12h,24h,30h,内眦静脉丛采血200μL,-20℃冰箱保存待检。所得数据采用DAS3.2.8药代动力学软件进行代谢动力学分析;SPSS23.0统计软件,采用t检验和方差分析。结果:1.成瘾模型的确定:行为学实验结果以CPP值(CPP score)来体现。通过统计分析得出A,B,C三个实验组与对照组的两两比较结果均表现出明显差异(P<0.01)。表明A,B,C三组均表现出明显的CPP效应。CPP效应是指在CPP实验中,通过动物在与药物相关环境中停留时间的增多(减少)甚至偏爱(厌恶)该环境来表明药物的偏爱(厌恶)效应。在本实验中,小鼠表现出明显的药物偏爱效应。2.正常小鼠给药后体内的代谢动力学过程:正常小鼠给药后3min在血液中均可检出甲卡西酮、卡西酮、麻黄碱及伪麻黄碱。甲卡西酮在血液中的代谢动力学符合一级吸收一室开放模型,代谢动力学过程受给药剂量的影响,消除半衰期与给药剂量呈正相关,A,B,C组消除半衰期分别为0.48h,0.55h和0.7h。给药后30h虽可以检出甲卡西酮,,但是在定量限以下;代谢物卡西酮,麻黄碱和伪麻黄碱的检出时限与给药剂量呈正相关,A,B,C组检出时限分别为4h,8h和10h。麻黄碱和伪麻黄碱的峰值浓度均在甲卡西酮峰值浓度的0.5%以内或卡西酮的6%以内。3.成瘾小鼠给药后的代谢动力学过程:成瘾小鼠给药后3min在血液中均可检出甲卡西酮、卡西酮、麻黄碱及伪麻黄碱。甲卡西酮在血液中的代谢动力学符合一级吸收二室开放模型,A,B,C组消除半衰期分别为0.587h,0.488h和0.549h。给药后30h虽可以检出甲卡西酮和卡西酮,但均在定量限以下;代谢物麻黄碱和伪麻黄碱的检出时限与给药剂量呈正相关,麻黄碱在A,B,C组的检出时限分别为6h,6h和8h;伪麻黄碱在A,B,C组的检出时限分别为6h,8h和10h。麻黄碱和伪麻黄碱的峰值浓度均在甲卡西酮峰值浓度的1%以内或卡西酮的6%以内。结论:1.建立了甲卡西酮诱导的小鼠条件位置偏爱动物模型,可以用CPP模型对成瘾性药物奖赏效应进行评价。2.建立了正常小鼠给药后体内甲卡西酮及其代谢物的代谢动力学研究模型,药物原体在正常小鼠体内的代谢动力学过程可用一级吸收一室模型描述。3.建立了成瘾小鼠给药后体内甲卡西酮及其代谢物的代谢动力学研究模型,药物原体在成瘾小鼠体内的代谢动力学过程可用一级吸收二室模型描述。4.正常小鼠和成瘾小鼠给药后甲卡西酮及其代谢物在体内的浓度代谢趋势基本相同,与剂量无关。成瘾小鼠和正常小鼠给药后相比,甲卡西酮代谢物的达峰时间基本相同,而且代谢物麻黄碱和伪麻黄碱的检出时限也很相近。但成瘾小鼠给药后会使甲卡西酮及其代谢物的峰值浓度增加;同时使代谢物卡西酮的检出时限发生明显变化。通过代谢物卡西酮的检出时限是否与甲卡西酮相近;以及甲卡西酮及其代谢物卡西酮、麻黄碱、伪麻黄碱峰值浓度的高低,可以判断是否是甲卡西酮成瘾。但还需要进一步的实验研究进行确证。
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