不同温胆汤制剂治疗痰热上扰型失眠的对比研究

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目的:以温胆汤传统汤剂为基础,对比研究温胆汤现代汤剂、颗粒剂两种现代制剂正丁醇萃取液的HPLC-DAD指纹图谱。建立基于化学成分指纹图谱特征的工艺和合理性评价方法。制备用于治疗痰热上扰型失眠的经典名方温胆汤制剂,对其制备工艺、质量标准、药效作用进行考察研究。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-0.3%磷酸水梯度洗脱,流速1.0m L·min-1,检测波长237 nm,柱温25℃;采用上述建立的检测方法对比研究温胆汤3种剂型的指纹图谱;采用2004 A版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》对3种制备工艺的正丁醇萃取层HPLC指纹图谱进行相似度评价,并考察各特征峰的相对保留时间、相对峰面积。以文献的传统制法制备温胆汤传统汤剂,以流动性、吸湿率和辅料配比为指标优选颗粒剂成型工艺。采用薄层色谱法对方中枳实、陈皮、茯苓、甘草、生姜、竹茹进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对橙皮苷、柚皮苷、甘草苷、甘草酸铵、6-姜辣素进行含量测定。以镇静实验、戊巴比妥钠协同致睡眠实验考察不同剂型温胆汤制剂的助眠效果。结果:制备3种不同剂型的温胆汤制剂,并建立其体外HPLC指纹图谱。传统汤剂、现代汤剂、颗粒剂的共有峰数目分别为10、13、10,其中有10个峰为3种制剂所共有,指认其中的5个共有峰分别为甘草苷、橙皮苷、柚皮苷、甘草酸铵、6-姜辣素。3种正丁醇萃取液样品的指纹图谱相似度均>0.85,不同批次的样品中各共有峰的相对保留时间和相对峰面积RSD均低于2%。温胆汤颗粒剂质量标准研究显示,通过定性分析,陈皮、枳实、生姜、甘草、茯苓、竹茹供试品色谱中在与对照物质相应的位置上显相同颜色的斑点;通过定量分析,确定温胆汤颗粒剂中:甘草苷含量不得低于0.85mg/g,橙皮苷含量不得低于10.16 mg/g,柚皮苷含量不得低于12.55 mg/g,甘草酸铵含量不得低于3.06 mg/g,6-姜辣素不得低于0.32 mg/g。不同给药组的镇静实验结果和戊巴比妥钠协同致睡眠实验结果同空白对照组相比具有显著性差异,相同给药剂量下的三种剂型药理实验结果无显著性差异。结论:上述数据说明:特定实验条件下,不同制备工艺的温胆汤制剂在物质基础和药理作用方面具有一定等效性。温胆汤颗粒剂工艺稳定,质量控制方法严谨科学,重现性良好。
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