本研究论文分为两部分:一、Militarine对原代培养少突胶质细胞的促分化作用研究;二、ZCG-1438对肌萎缩侧索硬化症治疗作用的初步研究。　　一、Militarine对原代培养少突胶质细胞的促分化作用研究　　由少突胶质细胞(Oligodendrocyte，OLG)形成的髓鞘是中枢神经系统信号高效准确传递、神经元轴突健康维持的物质基础，现已有大量证据表明，多种神经系统疾病中都存在由OLG损伤而致的髓鞘病变。成年动物脑内少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte Progenitor Cell，OPC)在一定条件下可分化成OLG以修复病变的髓鞘，因此，促进OPC分化成为治疗多种神经系统疾病的靶点之一。　　本实验室前期研究发现，化合物Militarine在慢性脑供血不足大鼠模型上，能增加胼胝体区域新生OLG的数量，减轻该区域缺血所致的白质损伤，改善动物学习记忆能力。本研究在此基础上利用原代培养新生大鼠OPC探究Militarine对其促分化作用及机制。　　A2B5是OPC的标志物之一，用于鉴别原代培养OPC，髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein，MBP)是OLG的标志物，在髓鞘形成中起着重要作用。ERK1/2、Akt和mTOR在细胞增殖、分化和存活的相关基因表达和蛋白翻译中起着重要调节作用，可能参与OPC分化的调节。本实验用Militarine(10-5、10-6和10-7M)与原代培养新生大鼠OPC共孵育3天，用免疫荧光法检测细胞纯度和分化情况，western blot法检测MBP表达量和分化相关通路蛋白。实验结果显示，本研究中原代培养新生大鼠OPC纯度在68％以上;与对照组相比，给予Militarine孵育后MBP阳性细胞数增加29.6％(10-5M)和20.1％(10-6M)，MBP表达量增加14.3％(10-5M)和18.2％(10-7M)，但无显著性差异。Militarine对ERK1/2、Akt和mTOR总蛋白和磷酸化Akt、mTOR表达量无显著影响;但能一定程度提高磷酸化ERK1/2的表达量。　　综上，本研究建立了原代培养OPC模型，发现Militarine对其有较弱的促分化作用，并且这种作用可能与ERK1/2的磷酸化相关。　　二、ZCG-1438对肌萎缩侧索硬化症治疗作用的初步研究　　肌萎缩侧索硬化症（Amyotrophic Lateral Sclerosis，ALS）是一种进行性的、不可逆性的神经肌肉疾病，因上下运动神经元变性导致肌肉逐渐无力和萎缩，患者常死于呼吸衰竭。目前经美国FDA批准用于ALS治疗的药物只有利鲁唑和依达拉奉，开发安全有效的新型治疗药物具有重要意义。　　ZCG-1438是由中国医学科学院药物研究所石建功课题组提供的化合物，前期结果显示具有一定的神经保护作用。本研究采用SOD1G93A小鼠模型，从70日龄开始给药至死亡终点，通过小鼠体重、生存期、疾病表型的神经学评分来监测病程进展，转棍实验监测运动协调能力，悬挂实验监测肌肉力量，尼氏染色观察腰段脊髓前角运动神经元。　　SOD1G93A小鼠体重变化能反映疾病的恶化程度;神经学评分是根据动物疾病表型对病情发展程度进行划分，能反映疾病进展情况。结果显示，与溶剂对照组相比，ZCG-1438(30mg/kg/d)推迟SOD1G93A小鼠发病时间16.9％(P＜0.05)，并延缓雄性动物体重下降，但对疾病恶化无延缓作用，也不能延长生存期。　　运动协调性和肌肉力量的迅速变弱和丧失是重要的ALS临床表现，也是ALS治疗药物必要的评价指标之一。从小鼠出生后第10-18周连续观察的结果得出，悬挂实验中，ZCG-1438(30mg/kg/d)组动物坠落潜伏期的缩短速度较溶剂对照组慢，但转棍实验中两组无明显差异。　　腰段脊髓前角细胞是支配后肢肌肉运动的主要下运动神经元，其退化和丢失是重要的ALS病理表现之一。结果显示，在疾病终末期，溶剂对照组运动神经元数目减少74.8％，ZCG-1438(30mg/kg/d)组减少68.2％，但两者无显著性差异。　　综上，ZCG-1438(30mg/kg/d)能推迟SOD1G93A小鼠发病，延缓雄性动物体重下降，对肌力衰退有一定改善作用，但对协调运动能力、生存期和脊髓前角运动神经元等评价指标无明显影响。