【摘 要】
：
目的:探讨肝癌细胞MGMT表达水平与OXA敏感性的相关性。方法:采用体外培养肝癌细胞株Bel-7402、SMMC-7721、HUH-7。用RT-PCR法检测MGMT的mRNA表达水平;Western-Blot方法检测MG
论文部分内容阅读
目的:探讨肝癌细胞MGMT表达水平与OXA敏感性的相关性。方法:采用体外培养肝癌细胞株Bel-7402、SMMC-7721、HUH-7。用RT-PCR法检测MGMT的mRNA表达水平;Western-Blot方法检测MGMT蛋白的基础表达水平;MTT法计算各肝癌细胞的IC50;对比肝癌细胞MTT,并通过甲基化特异性PCR,检测所有细胞的MGMT甲基化的状态;Western-Blot方法检测加OXA后r-H2Ax的表达来评价DNA损伤程度;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:各肝癌细胞系均可检测到MGMT基因和蛋白的表达,其中HUH-7 MGMT的mRNA以及蛋白水平最高;而Bel-7402的MGMT的mRNA以及蛋白水平最低,且三者的MGMT蛋白水平与mRNA水平呈正相关。根据MTT结果计算出HuH-7、SMMC-7721、Bel-7402对OXA的IC50分别为246.76μg/ml、48.43μg/ml以及31.35μg/ml,根据相关性分析得出MGMT的mRNA及蛋白表达水平与IC50呈正相关,即MGMT表达水平越高,其IC50值越大。MGMT的甲基化结果显示HuH-7的MGMT的甲基化表达水平最低,Bel-7402的MGMT的甲基化表达水平最高,根据相关性分析得出MGMT启动子甲基化水平与MGMT的mRNA与蛋白水平以及IC50呈负相关。加OXA12h后r-H2Ax均有不同程度表达,其中Bel-7402的r-H2Ax升高最明显而HuH-7升高最少。流式细胞仪检测凋亡,显示加入OXA后Bel-7402早期凋亡率最高,而HuH-7的凋亡率最低。结论:肝癌细胞中MGMT的mRNA及蛋白表达水平越高,OXA对其杀伤力越弱;肝癌细胞中MGMT的mRNA及蛋白表达水平越低,OXA对其杀伤力越强。肝癌细胞中MGMT启动子甲基化水平越高,对OXA越敏感;肝癌细胞中MGMT启动子甲基化水平越低,对OXA越不敏感。
其他文献
目的:肾细胞癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁我国人群的健康。随着对肿瘤病因研究的不断深入,发现表观遗传学改变在肿瘤的发生、发展
为了满足公共建筑中空调系统部分负荷下的节能运行调节需求,制冷机房经常配置多台冷水机组。空调系统中冷水机组能耗占比较高,而机组序列控制在系统满足室内负荷需求与节能中
目前城市区域建筑能源规划阶段单体建筑信息不完备、无法同时使用常规负荷计算软件对各建筑进行冷热电力负荷预测,本文提出采用蒙特卡罗模拟方法结合负荷计算原理预测区域建
介绍了医用金属材料目前的研究现状、性能和应用，指出了医用金属材料应用中目前存在的主要问题，阐述了近年来生物医用金属材料的新进展，提出镁及镁合金材料的应用是生物医用金属
背景:垂体腺瘤是一种好发于垂体前叶的良性肿瘤,发病率仅次于胶质瘤、脑膜瘤而位居颅内好发肿瘤的第三位。它常表现出内分泌症状及压迫症状,尤其是临床无功能腺瘤,常常在患者
目的:探讨多烯磷脂酰胆碱与奥沙利铂联合作用对胃癌细胞增殖的影响。方法:MTT法检测多烯磷胆碱、奥沙利铂及两药共同作用在浓度、时间不同时对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;流
研究目的研究胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(Gli-2)和增值生长因子(Ki-67)在胸腺肿瘤组织中的表达及其和胸腺肿瘤组织临床病理特征及预后的关系。研究方法采用免疫组化方法检测2
城市建设作为城市发展的重要标志之一,其发展的好坏也在很大程度上影响了城市发展的进程。而现在的园林工程建设也作为城市建设的重要内容之一,其发展也越来越代表着城市建设
<正> 中医所称的石淋病当包括膀胱结石一病在内,如医宗金鉴廿一卷云“淋之为病小便如栗状,腹弦急痛引脐中”;及“温淋蓄久石淋成,溲如沙石茎中痛”等之所述,均与膀胱结石之症
研究背景：B类Ⅰ型清道夫受体(Scavenger receptor class B type I, SR-BI)是公认的高亲和力的高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)受体。人SR-BI主要在肝脏和类固醇