沙地云杉体细胞胚胎发生研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:liongliong595
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沙地云杉(Picea mongolica)是内蒙古特有的珍稀树种。本试验以沙地云杉的成熟胚为外植体材料,研究了不同培养基、不同激素组合、不同培养条件对沙地云杉胚性愈伤组织诱导和增殖、体细胞胚的成熟和萌发的影响,最终建立了沙地云杉体细胞胚胎发生体系,主要结论如下:1.确定了沙地云杉胚性愈伤组织诱导的最适培养组合为:LM+2,4-D 6mg/L、6-BA2mg/L和KT0.5mg/L,附加500 mg/L水解酪蛋白、450 mg/L谷氨酰胺、20g/L的蔗糖和3g/L的Gelzan凝胶,pH值调至5.9。最佳培养条件为暗培养,胚性愈伤诱导率46%。2.确定了沙地云杉胚性愈伤增殖的最佳培养组合为:LM+NAA 0.1mg/L.6-BA 0.5mg/L、KT0.2mg/L。添加500 mg/L水解酪蛋白、450 mg/L谷氨酰胺、20g/L的蔗糖和3g/L的Gelzan凝胶。最佳增殖效果为4次继代。增殖了2.72倍。3.确定了沙地云杉体细胞胚成熟的最佳培养组合为:LM+ABA 5.0mg/L、IBA 0.5mg/L、AgNO3 5.0mg/L,有机附加物为500 mg/L水解酪蛋白、450 mg/L谷氨酰胺、1g/L的肌醇、40g/L的蔗糖和3g/L的Gelzan凝胶。两次继代(40d)后,长出成熟的体细胞胚。体胚成熟率为88%。4.确定了沙地云杉体细胞胚萌发的培养组合为:LM培养基,附加1g/L活性炭、500 mg/L水解酪蛋白、450 mg/L谷氨酰胺、30g/L的蔗糖和3g/L的Gelzan凝胶,不添加任何激素。培养条件为1/2光暗培养,光照强度均为12001x。体胚萌发率为40%。
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