本实验从妊娠早期胎儿肝脏中分离获得具有肝干细胞特征的肝脏原始细胞(hFHSCs),对其一般生物学特性及增殖分化机制进行研究。结果如下:(1)通过联合酶消化、重力沉降、单克隆消化及选择性消化获得hFHSCs;分离纯化方法简单易操作,很好地保持了细胞活力,细胞纯度较高;(2)hFHSCs符合肝干细胞的基本特征:在体外具有很强的增殖能力;同时表达肝系及胆系标志物,提示具有双向分化潜能;核型分析正常且无致瘤性,提示为正常细胞;(3)hFHSCs可表达EGF、EGF-R及c-met,缺失表达HGF,表明HGF通过旁分泌途径作用与hFHSCs细胞的受体c-met结合,从而发挥其生物学功能;(4)HGF和EGF对hFHSCs有明显的促增殖作用;(5)HGF对hFHSCs向成熟肝细胞分化有重要影响,EGF可协同其发挥作用;(6)建立了体外诱导分化体系,为解决人源性肝细胞治疗供体短缺问题提供了理论线索;(6)HGF可促进hFHSCs细胞中NF-κB活化,该信号转导途径可能是HGF促进hFHSCs增殖分化的重要通路。本研究为获取人源肝干细胞提供了一种简单易行的方法,同时在体外建立了有效的向成熟肝细胞诱导分化的培养体系,而分化机制的探讨为进一步优化该体系提供了理论基础;整体连续的研究将为解决供体肝细胞短缺及最终在临床实现肝细胞和肝干细胞移植提供实验依据和新线索。