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水稻白叶枯病（Rice bacterial leaf blight）、水稻细菌性条斑病（Rice bacterialleaf streak）和水稻细菌性谷枯病（Rice panicle blight）分别由白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）、细菌性条斑病菌（X. oryzae pv.oryzicola）和细菌性谷枯病菌（Burkholderia glumae）引起，并主要通过带菌种子进行传播。2007年，我国把这3种病菌列入进境植物检疫性有害生物名录。由于快速、灵敏和特异性强，普通PCR和实时荧光定量PCR（SYBR greenreal-time PCR）被广泛用于病害的检测。然而，针对X. oryzae pv. oryzae、X.oryzae pv. oryzicola、B. glumae这3种病原同步检测的体系仍未见报道。本论文分别根据水稻白叶枯病菌的糖基转移酶基因（putativeglycosyltransferase gene）（NCBI No. AF169030.1）、水稻细菌性条斑病菌的AvrRxo基因(NCBI No. AY395713.1)和水稻细菌性谷枯病菌16S rDNA的转录间隔序列（ITS）(NCBI No. D87080.1)进行特异性引物设计，结果表明3对引物特异性强，目标片段大小分别为230bp、112bp和164bp。对其灵敏度检测表明：常规PCR对X. oryzae pv. oryzae、X. oryzae pv.oryzicola和B. glumae DNA的检测最低限度分别为1pg/μl、0.5pg/μl和1pg/μl；实时荧光定量PCR对X. oryzae pv. oryzae、X. oryzae pv. oryzicola和B. glumaeDNA的检出限分别为1fg/μl、1fg/μl和10fg/μl。多重PCR可在一个PCR反应内实现对多种病菌的特异性扩增。本研究建立了对X. oryzae pv. oryzae、X. oryzae pv. oryzicola和B. glumae进行同步检测的多重PCR体系；对多重PCR灵敏度的检测结果表明，X. oryzaepv. oryzae、X. oryzae pv. oryzicola和B. glumae的检出限分别达到0.3pg/μl、0.167pg/μl和16.7pg/μl，与单独进行PCR的灵敏度接近。由于没有获得自然界中同时带有X. oryzae pv. oryzae、X. oryzae pv.oryzicola和B. glumae这3种病原菌的水稻种子，本研究对人工接种这3种病原的模拟带菌种子进行检测。结果表明，X. oryzae pv. oryzae、X. oryzae pv.oryzicola和B. glumae均能被检测到，且目的片段大小分别为230bp，164bp和112bp。综上所述，本研究建立了一种利用多重PCR技术对3种水稻检疫性病原进行同步检测的方法。该方法简单，快速，灵敏，可用于病原菌的快速检测领域。