单颗粒计数是一种由荧光相关光谱或共振光散射相关光谱法发展而来的测定物质浓度的单分子检测方法，它的原理是通过统计粒子由于布朗运动进出检测微区的次数来确定浓度，单颗粒计数在浓度的检测上具有检测限低、可以不受复杂体系干扰的优点。目前，单颗粒计数局限于检测发射荧光信号的量子点或者染料。对于金、银纳米粒子等贵金属纳米粒子的单颗粒检测还没有相关研究，主要原因在于共振光散射信号与背景信号难以区分。　　贵金属纳米粒子以其优异的光学性能在生物分析方面具有非常广泛的应用。本文目标是将单分子检测方法与贵金属纳米粒子优异光学性能相结合，发展高灵敏的生物分析方法。本文首先构建了一种基于贵金属纳米的单颗粒计数方法。通过分析检测系统中背景信号来源，发展了阈值的确定、数据处理和实验条件优化方法。将单颗粒计数方法成功地用于金和银纳米粒子浓度的测定。然后基于单颗粒计数技术，发展了一种测定凝血酶的分析方法。在凝血酶测定中采用两种分析模式，一种是利用核酸适配体和凝血酶的特异性结合，另一种是利用凝血酶催化纤维蛋白原聚合。实验结果表明，后一种方法操作步骤简单、检测时间短、检测灵敏度高，同时结合了单颗粒计数方法耗样量少的优点。凝血酶检测的线性范围为0.32 pM-32 pM，检出限为0.44 pM，用这种方法对人血浆中凝血酶原的含量进行了测定。我们的研究结果表明单颗粒计数法可能在生物分析领域、临床和基础研究中具有很好的应用前景。