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白簕（Acanthopanax trifoliatus（L.）Merr.）为五加科五加属代表植物,又名刺三甲、簕菜等。白簕为民间常用药用植物,其根具有祛风除湿、舒经络、活血脉的功效,白簕的叶子用来治疗痈肿疮毒、支气管炎、肩周炎等症。但白簕基础研究和开发远不及同是五加科中药的人参,研究空间广阔。本课题以白簕为研究对象,利用现代美白理论,探究白簕美白活性成分的提取工艺、精制方法和酶学美白机制,考察其安全性,进而制备白簕软膏新剂型,为白簕的进一步研究开发提供基础和依据,本文的研究内容如下:1)采用单因素试验和响应面分析确定白簕美白活性成分的最佳提取工艺。以酪氨酸酶活性抑制率和DPPH自由基清除率的综合评分为指标,先对安徽和广东两个产地的白簕水提液和醇提液进行对比,发现安徽白簕水提液和醇提液的酪氨酸酶抑制率和DPPH自由基清除率都强于广东白簕,即安徽白簕的综合评分更高。并且两个产地的白簕水提液的综合评分对比于醇提液均更高。然后采用进行响应面分析,确定白簕最佳提取方法为:提取溶液为水,料液比为1:11（g）/（m L）,提取时间为2h,提取温度为75℃,综合评分为0.561。通过验证实验,得到实际测量值为0.560,和模型的预测理论值基本吻合,证明模型可靠。2)通过大孔树脂的吸附试验,以酪氨酸酶抑制率、DPPH自由基清除率和干浸膏得出率的综合评分为指标,考察HPD450、D101、AB-8和D4020大孔吸附树脂静态吸附法精制白簕提取物的效果,来确定最佳的白簕提取液精制方法。先对比大孔树脂的水洗液和解吸液的综合评分,发现解吸液的综合评分高于水洗液。由此推断,选择大孔树脂吸附法在精制方面有较好的效果。然后通过对比几种大孔吸附树脂所得解吸液的综合评分,确定白簕提取液的最佳精制方法为:采用D4020大孔吸附树脂,以药液:大孔树脂=10:3（m L:g）的比例进行精制,此时能够最大程度上去除杂质,获得最佳的精制效果。3)采用红细胞溶血试验和皮肤腐蚀性大鼠经皮电阻试验考察白簕精制液的安全性。对红细胞溶血实验数据的线性回归分析,可得白簕精制液浓度X与溶血率Y的线性回归方程为:Y=11.117X-0.0094,R~2=0.9536。当浓度为1g/m L时,溶血率=0.7980%<5%。经过大鼠经皮电阻试验,电阻值为13.93kΩ,在5～15kΩ之间。然后结合SRB染色结果计算SRB吸收量,并与阳性对照组作比较,判断白簕精制液受试物不具有皮肤腐蚀性,并且无刺激性。4)通过抑制酪氨酸酶活性试验,发现白簕精制液抑制单酚酶活性的效果不明显,抑制二酚酶活性的效果显著,抑制二酚酶IC50值为61.351 mg/m L。在一定浓度范围内,酪氨酸酶活性抑制效果与白簕精制液的浓度呈正相关。白簕精制液与L-多巴对二酚酶活性的抑制为可逆性竞争抑制。经过试验计算出[EI]和[ESI]的抑制常数KI、KIS分别是0.0053mg/m L、0.0107 mg/m L,KI
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