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目的:运用代谢组学的技术和方法,观察热补针法调节RA寒证模型家兔血液代谢物的表达变化,探讨热补针法治疗RA的相对特异性机制。方法:40只健康清洁级青紫蓝家兔随机分为正常组、模型组、平补平泻组、捻转补法组、热补针法组,各8只。以卵蛋白诱导配合低温冷冻法制备RA寒证模型,除正常组、模型组外,其余各组分别于双侧足三里穴施以平补平泻法、捻转补法与热补针法针刺,1次/日,留针30min/次,共7次。观察各组家兔一般状况,测定痛阈、关节肿胀度,观察滑膜病理学改变、统计病理积分,制备血清,对血清进行液质联用(LC-MS)技术检测,对数据进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),通过变量重要性投影值(VIP>1)和P值(P<0.05)筛选出血清中的差异代谢物。结果:1.家兔一般状况的变化正常组家兔饮食、饮水、活动等均无任何异常改变;模型组家兔蜷缩,精神状态较差,体毛杂乱、不光泽,活动量减少,饮食、饮水量均减少,膝关节肿胀,触之出现躲避行为,膝关节局部皮肤冰冷;各针刺组精神状态、活动量、关节肿胀度等较模型组均明显改善。2.家兔痛阈值的变化模型组家兔痛阈明显低于正常组(P<0.05);各针刺组家兔痛阈均高于模型组(均P<0.05);热补针法组家兔痛阈高于平补平泻组和捻转补法组(均P<0.05)。3.家兔膝关节周径的变化模型组家兔膝关节周径大于正常组(P<0.05);各针刺组家兔膝关节周径均小于模型组(均P<0.05);热补针法组膝关节周径与平补平泻组和捻转补法组比较没有显著差异(均P>0.05)。4.家兔滑膜组织形态学和病理积分变化正常组:滑膜细胞排列整齐,无增生肿大,未发现炎性细胞浸润,滑膜基质无增殖。模型组:滑膜被覆细胞增生肿大严重,巨细胞、淋巴细胞常见,炎性细胞浸润明显,滑膜基质增生显著。平补平泻组和捻转补法组:滑膜细胞增生较模型组减少,有少许巨细胞、淋巴细胞,炎性细胞中度浸润,中度滑膜基质增生。热补针法组:滑膜被覆细胞增生肿大程度明显减轻,罕见巨细胞,炎性细胞轻度浸润,有轻度滑膜基质增生。模型组家兔膝关节滑膜组织病理积分明显高于正常组、平补平泻组、捻转补法组和热补针法组(均P<0.05);各针刺组滑膜组织病理积分均显著低于模型组(均P<0.05);热补针法组滑膜组织病理积分明显低于平补平泻组和捻转补法组(均P<0.05)。5.主成分分析(PCA)结果从PCA得分图中可以看出各组聚类明显,说明五组样本有明显差异,各针刺组有沿t[1]轴回归正常组的趋势,并且热补针法组最明显。6.偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)结果模型组家兔血液代谢物变化较正常组主要体现于肉碱、溶血性磷脂酰胆碱(LysoPC(14:0))、LysoPC(18:3)、溶血性磷脂酰乙醇胺(LysoPE(0:0/20:5))、LysoPE(0:0/22:1)、癸酸、硬脂酸以及乳酸的含量均升高,亮氨酸、缬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、焦谷氨酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸、苹果酸、半乳糖、甘露糖的含量均降低,上述代谢物具体涉及到脂肪酸、氨基酸、三羧酸循环以及糖类代谢。各针刺组上述代谢物均出现回调,热补针法组对RA寒证模型家兔三羧酸循环与糖代谢的回调作用均明显优于平补平泻组和捻转补法组。结论:(1)热补针法对RA寒证模型家兔具有相对特异性治疗作用;(2)热补针法能相对特异性改善RA寒证模型家兔的病理形态、降低滑膜组织病理积分;(3)热补针法能够相对特异性调控三羧酸循环与糖代谢;(4)调控能量代谢是热补针法相对特异性治疗RA寒证模型家兔的作用机制之一。