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目的:建立鸡胚绒毛尿囊膜动态血管发育模型,观察和分析血管发育过程中miRNA的表达变化,为确定血管发育关键调控miRNA及其下游基因提供实验依据。方法:利用鸡胚绒毛尿囊膜血管发育周期短,可操作性强的特点,选取新鲜、大小均匀的种蛋,自行孵育,原位观察第一天到第二十一天的鸡胚绒毛尿囊膜血管发育情况,确定尿囊膜血管初生、旺盛和消退的三个时间点,建立动态血管发育模型。选取不同时间点的尿囊膜血管,提取蛋白,用Western blotting技术检测FGF2和TGF-β2蛋白在血管发育的这三个阶段的表达量的变化,判断动态血管发育模型是否建立成功。用Trizol法提取总RNA,紫外吸收测定法测RNA浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳观察28s、18s带,检测提取的RNA的质量,制作miRNA芯片,分析在血管发育过程中miRNA的变化。结果:研究发现第四天、第十三天、第十六天分别为血管发育的初生、旺盛和消退的三个时间点;Western blotting检测结果与文献报道相符;血管发育过程中miRNA的表达变化:⑴、旺盛期与初生期比较:表达上调的有5个miRNA,表达下调的有1个miRNA;⑵、消退期与初生期比较:表达上调的有37个miRNA,表达下调的有4个miRNA;⑶、消退期与旺盛期比较:表达上调的有27个miRNA,表达下调的有2个miRNA。结论:1、利用鸡胚绒毛尿囊膜血管动态发育周期短,血管发育过程中存在明显的初生期、旺盛期、消退期不同阶段,且可重复性强的特点,可建立一种新型动态血管发育模型。2、血管发育的初生期、旺盛期、消退期不同阶段,相对应出现的miRNA表达谱的显著变化,为确定血管发育关键调控miRNA及其下游基因提供了新的思路和方向。