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癌症是一种一直严重威胁人类健康的疾病,给人类带来巨大的经济和社会负担。传统的癌症治疗方法包括手术、放疗和化疗,这些治疗方法在杀死癌症细胞的过程中也对机体的正常组织造成了巨大的损害,具有明显的局限性,严重影响癌症患者的预后和生活质量。在杀死癌症细胞的过程中尽可能减少对机体正常组织的损伤是肿瘤治疗的关键。肿瘤的生物治疗已经是继传统治疗方式后的一种新的治疗方式。溶瘤病毒生物疗法能特异性地靶向肿瘤细胞,并且可以激发机体内的天然免疫反应,增加肿瘤的治疗效果而不损伤机体的正常组织,而且在杀死肿瘤细胞后释放的子代病毒可以继续感染周围的肿瘤细胞。溶瘤性单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simplex virus,oHSV)已被证明是治疗肿瘤的有效方法。尤其是已经被批准上市的T-VEC更是为肿瘤的生物疗法开启了新的大门。与删除γ34.5后的单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)相比,改造糖蛋白后的oHSV不仅可以特异性靶向肿瘤细胞,且更安全和有效。HSV病毒颗粒表面的糖蛋白D(glycoprotein D,gD)是决定HSV趋向性的一个重要糖蛋白,经过改造gD的HSV可以特异性靶向癌细胞。但是病毒表面的糖蛋白在体内可以刺激机体产生强烈的中和抗体,这些中和抗体的产生限制了oHSV的使用。目的:观察新分离出的HSV毒株的gD氨基酸与国外分离的HSV毒株gD氨基酸序列的进化关系,探索改造gD的氨基酸位点,从而改造出更适合中国人的用于癌症治疗和影像的oHSV。方法:本课题前期从北京的一名急性感染患者口腔疱疹病灶中分离HSV病毒,并进行培养、提取病毒的DNA,进行二代测序,将该病毒命为HSV-1-LXMW,从测序结果中选取gD的DNA序列并将其翻译成氨基酸序列,同时从NCBI数据库中找出HSV-1毒株17、H129、RH2、SC16、Patton isolate、F、KOS和HSV-2毒株SD90e、HG52、G的gD的氨基酸序列。为了进一步分析这11个毒株的gD氨基酸序列的进化关系,将这些毒株的氨基酸序列进行排列对比、用MEGA7软件构建了这11个毒株的gD的氨基酸序列的进化树、预测LXMW、HSV-1-17和HSV-2-HG52 gD的功能区和二级结构、在线预测了这11个毒株的模体(motif)。结果:(1)在中国北京分离的HSV-1-LXMW的gD氨基酸序列和从美国纽约分离的HSV-1-Patton isolate和从美国普林斯顿分离的HSV-1-KOS比较接近,三者的氨基酸序列完全相同,有2个氨基酸位点(amino acids,AA)(AA 365和AA 369)跟其他的HSV-1 gD的序列不同,HSV-1-17中的AA 25和AA 367跟其他的HSV-1 gD不同,除了AA 25位于信号肽的位置,其它的3个位于胞质区;(2)所有的HSV-1 gD包含394个氨基酸,HSV-2-SD90e和HG52有393个氨基酸,HSV-2-G有347个氨基酸,在gD的氨基酸序列对比中发现了19个保守区域和8个可变区;(3)进一步用在线网站预测了10个新的模体,对比了这11个毒株模体的差异,总结了在经过gD改造的溶瘤病毒的氨基酸位点和模体的关系。结论:(1)发现中国分离的新毒株HSV-1-LXMW gD序列与美国分离的HSV-1-Patton isolate和-KOS毒株接近;(2)预测的HSV病毒尚未研究的gD模体,为进一步研究用于影像和溶瘤的HSV提供了新方向。