活化蛋白C在宫内炎性暴露后脑白质损伤中的作用及机制研究

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目的脑白质损伤(white matter damage,WMD)是导致早产儿神经系统后遗症的重要危险因素。近年来,大量流行病学资料和实验研究显示WMD与宫内感染/炎症之间存在密切关系。然而,对WMD尚无有效的预防和治疗方法。由于APC具有强大的抗炎效应,所以本实验通过体外实验了解APC在LPS诱导后的小胶质细胞炎性反应中的作用,探讨APC的疗效。可以为今后建立安全有效的早产儿脑白质损伤防治方案提供理论和实践依据。方法取新生1日龄SD大鼠,分离其脑组织,原代培养小胶质细胞并进行分离纯化,并利用抗Iba1进行鉴定。随机分成4组,分别为对照组(PBS干预)、炎性组(LPS干预)、LPS+APC组(LPS干预后再予APC)、APC组(APC干预)。在显微镜下观察小胶质细胞形态变化,并行免疫荧光标记,透过积分光密度值(IOD)的荧光表达强度来观察TNF-α、PAR-1的表达。结果成功培养原代小胶质细胞,给予LPS刺激诱发炎症反应后,小胶质细胞形态出现活化表现,APC干预可以逆转LPS干预引起的形态学改变;LPS干预后,炎症因子TNF-α大幅度上调(P<0.01),而APC干預可以降低其表達水平,但與陰性對照組、APC组無差異(P>0.05)。LPS暴露下,LPS组、阴性对照组、APC组的保护性受体PAR-1没有受到影响(P>0.05),而LPS+APC组在APC干预后保护性受体PAR-1可以显著地表达(P<0.01)。结论成功的分离纯化小胶质细胞。APC的干预可以逆转LPS诱导的炎症反应,起到抑制炎症的作用。部分透过上调小胶质细胞中PAR-1的表达起到保护的作用。此实验提供初步证据示APC治疗可能降低产妇宫内感染/炎性暴露后所导致的早产儿脑白质损伤性疾病的风险。
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