【摘 要】
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目的:本项目通过检测经脑血管造影检查证实的不同程度颅内外大动脉粥样硬化性狭窄患者血清标本中IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α水平,分析该类患者特别是重度狭窄有无侧支循环血流灌注患者的IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α表达的差异性及其相关性;此外,由于小胶质细胞在缺血性脑损伤中发挥不可或缺的作用,因此,我们还研究HIF-α对小胶质细胞M1极化的影响,为抑制小胶质细胞极化进而保
【基金项目】
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柳州市重点研发科技计划项目（项目批准号:2019BJ10611）; 广西壮族自治区卫健委自筹课题（项目批准号:Z20210514）
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目的:本项目通过检测经脑血管造影检查证实的不同程度颅内外大动脉粥样硬化性狭窄患者血清标本中IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α水平,分析该类患者特别是重度狭窄有无侧支循环血流灌注患者的IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α表达的差异性及其相关性;此外,由于小胶质细胞在缺血性脑损伤中发挥不可或缺的作用,因此,我们还研究HIF-α对小胶质细胞M1极化的影响,为抑制小胶质细胞极化进而保护缺血性脑损伤找寻新方向。方法:临床研究-收集我院神经内科诊断缺血性脑梗死且经脑血管造影检查患者的血标本,根据纳入标准及颅内外大动脉粥样硬化性狭窄程度分为5组,每组纳入至少30例,再收集我院体检中心健康查体人员30例作为对照组。使用ELISA试剂盒检验各组IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α表达水平并进行分析比较,并且对患者临床资料、既往史进行分析比较。实验研究-用HIF-α重组蛋白刺激BV-2细胞,根据不同刺激浓度分为6组,采用流式细胞技术观察小胶质细胞M1细胞群和M2细胞群,并进行观察分析,采用Western Blot法检测小胶质细胞M1极化JAK2/STAT1/NF-κβ通路中的p-STAT1蛋白和NF-κβp65蛋白,分析其条带结果。结果:与重度颅内外大动脉粥样硬化性狭窄组相比,正常对照组、无颅内外大动脉粥样硬化性狭窄组和轻度颅内外大动脉粥样硬化性狭窄组患者体内IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α表达水平均显著降低（P＜0.05）。有/无侧支循环组中IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α水平表达无显著差异。IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α因子之间互有相关性,说明它们可共同作用于颅内外大动脉粥样硬化性狭窄的发展过程。ROC曲线分析说明IFN-γ、IL-4和HIF-α可作为颅内外大动脉粥样硬化性狭窄的诊断因子且具有较好的诊断效果。二元Logistic回归分析说明HCY、Hb Alc和HIF-α是颅内外大动脉粥样硬化性狭窄的独立危险因素（P＜0.05）。免疫共聚焦显微镜下观察到经重组HIF-α蛋白刺激后BV-2细胞形态发生M1型极化形态改变,且HIF-α诱导小胶质细胞M1极化可能是通过NF-κβ相关通路介导的,但可能不涉及STAT1相关通路,表现为随着HIF-α刺激浓度增加,NF-κβp65蛋白表达水平增加,而P-STAT1无明显差异。结论:IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α的水平在不同程度的颅内外大动脉粥样硬化性狭窄患者体内具有差异性,狭窄程度加重,IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α的表达会升高,IFN-γ、IL-4、IL-17A和HIF-α有望成为颅内外大动脉粥样硬化性狭窄的诊断或治疗新靶点。此外,小胶质细胞在缺血性脑损伤中有重要作用,我们发现HIF-α对小胶质细胞M1极化有一定的促进作用,其作用可能通过NF-κβ相关通路实现的。
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