论文部分内容阅读
目的过氧化物氧还原蛋白（peroxiredoxin-1,Prx-1）是一种新型过氧化物酶,本研究利用慢病毒载体使小鼠肺组织高表达Prx-1,观察Prx-1对SiO2诱导的矽肺肺组织炎症的影响,并初步探讨其作用机制,为矽肺靶向治疗新靶点的选择提供新方向。方法12周雄性C57小鼠随机分为4组,每组10只:1)对照组:给予生理盐水;2)矽肺组:经支气管插管灌注SiO2悬液（5mg/只）;3)转染对照组:经支气管插管灌注SiO2悬液（5mg/只）+空载慢病毒（107TU/只）;4)Prx-1转染组:经支气管插管灌注SiO2悬液（5mg/只）+Prx-1慢病毒（107TU/只）。模型制备后,小鼠常规饲养1周。1周后,H.E染色观察肺组织形态变化,免疫组化法检测8-OHdG、CD68、M1型巨噬细胞（iNOS）表达情况,FinePointe WBP全身体积描积系统检测肺功能,免疫印迹法检测Prx-1、NF-κB和P-Src蛋白表达水平、H.E染色高倍视野下计数肺泡灌洗液中巨噬细胞数量,Real-time PCR检测IL-1β、TNF-α、TGF-β1。结果1 H.E染色显示:对照组肺组织结构正常,肺泡间隔纤细,炎细胞浸润少;矽肺组和转染对照组肺组织可见明显矽结节,肺泡腔及肺泡间隔有巨噬细胞和淋巴细胞浸润;与矽肺组和转染对照组比较,Prx-1转染组肺组织病变减轻,矽结节变小。2免疫组化结果显示:与对照组比较,矽肺组和转染对照组8-OHdG、CD68、iNOS阳性表达评分明显上升;与矽肺组比较,转染对照组8-OHdG、CD68、iNOS阳性表达评分无明显变化,但Prx-1转染组三项检测指标的阳性表达评分明显下降。3肺功能结果显示:与对照组比较,矽肺组和转染对照组潮气量（TVb）、每分钟通气量（MVb）、最大呼气流速（PEF）降低,呼吸频率（f）增快;与矽肺组比较,转染对照组的各项呼吸检测指标无明显区别,但Prx-1转染组TVb、MVb、PEF增加,f降低。4肺泡灌洗液巨噬细胞计数结果显示,矽肺组和转染对照组巨噬细胞数量增加较对照组明显增加,两组增加幅度相一致;与矽肺组和比较,Prx-1转染组巨噬细胞数量下降,差异有统计学意义。5免疫印迹结果显示:与对照组比较,矽肺组和转染对照组Prx-1、NF-κB和P-Src蛋白表达上调;与矽肺组比较,Prx-1转染组Prx-1蛋白表达进一步上调,但NF-κB和P-Src蛋白表达下降。6 Real time-PCR结果显示:与对照组相比,矽肺组和转染对照组IL-1β、TNF-α、TGF-β1表达量明显增加;与矽肺组比较,Prx-1组IL-1β、TNF-α、TGF-β1表达量明显下调。结论Prx-1高表达具有抑制矽肺小鼠肺组织炎症的作用,这种作用与抑制ROS/NF-Κb/Src通路激活,减少巨噬细胞向M1型分化和IL-1β、TNF-α等炎症因子合成有关。图10幅;表4个;参51篇。