小鼠溃疡性结肠炎模型中娃儿藤碱类化合物W-8对Treg细胞分化调控的机制研究

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作为T淋巴细胞的一个亚群,调节性T细胞(Treg)主要维持免疫的自我耐受和动态平衡。因为调节性T细胞(Treg)能使机体有效耐受自身抗体,同时能够在抑制自身免疫疾病方面发挥重要作用,所以Treg的异常通常会导致多种自身免疫性疾病。转录因子Foxp3对Treg细胞发育和分化有着不可替代的作用,关键作用的发挥使转录因子Foxp3格外重要。   小鼠溃疡性结肠炎是一种以结肠发生免疫性病变为主要症状的自身免疫性疾病,我们选择小鼠的该模型,主要是考虑到其在筛选药物上有一定的优势。结肠炎是由TNBS诱导的,本论文主要是观察娃儿藤碱类化合物W-8对小鼠的结肠炎是否具有显著的治疗作用,这是决定W-8药理作用最核心的部分。娃儿藤碱是一类化合物的总称,之前研究表明其具有抗炎作用,还有研究报道其具有抗肿瘤的特性,但其对机体免疫环境可能的影响还不是很确定。我们在合成的一系列娃儿藤碱衍生物中进行多次可重复的筛选,并对它们的免疫调节活性进行了检测。最终我们选择了W-8,因为它可显著增强Foxp3的表达。   本实验利用TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎疾病模型,对发病中的C57BL/6老鼠进行分组,区别性地使用W-8,观察小鼠的表观指标,同时观察不同组小鼠的免疫器官及外围组织的Treg情况,综合小鼠肠道的病理切片的评分及观察,从而确定了W-8对TNBS诱导的溃疡性肠炎具有保护作用。之后从分子层面研究W-8对于Treg细胞中Foxp3的表达调控具有作用,从信号通路上来说,W-8抑制AKT/mTOR信号通路作用,从而对于Smad3的磷酸化水平发挥上调作用,而Foxp3最主要的还是受Smad3信号通路的调控,因此是从两个层面将W-8对TNBS诱导的小鼠溃疡性结肠炎疾病模型具有保护作用进行了阐述。W-8确实在局部淋巴结和炎症部位中显著提高了Treg细胞的数量,并且上调了Foxp3的表达水平,可以将化合物W-8视为一个潜在的免疫调节抑制剂。
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