【摘 要】
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目的研究并阐明甲状腺乳头状癌组织内碘含量与细胞外碘刺激下ING4基因表达情况;探讨碘、甲状腺乳头状癌、ING4三者之间的潜在关系,为进一步研究碘对甲状腺乳头状癌发病机制的影响提供依据。方法1.基于ICP-MS法检测甲状腺乳头状癌组织及其癌旁组织内碘含量,比较分析癌组织及其癌旁组织中碘含量的差异。2.检测甲状腺乳头状癌及其癌旁组织中ING4 mRNA（RT-qPCR）和蛋白（Western-Blot
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目的研究并阐明甲状腺乳头状癌组织内碘含量与细胞外碘刺激下ING4基因表达情况;探讨碘、甲状腺乳头状癌、ING4三者之间的潜在关系,为进一步研究碘对甲状腺乳头状癌发病机制的影响提供依据。方法1.基于ICP-MS法检测甲状腺乳头状癌组织及其癌旁组织内碘含量,比较分析癌组织及其癌旁组织中碘含量的差异。2.检测甲状腺乳头状癌及其癌旁组织中ING4 mRNA（RT-qPCR）和蛋白（Western-Blot）的表达情况。3.CCK8法检测不同浓度KIO3溶液刺激人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞系、人甲状腺正常细胞Nthy-ori 3-1细胞系24、48、72、96、120小时后的细胞活力变化情况。4.检测不同浓度KIO3溶液刺激24小时后人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞系、人甲状腺正常细胞Nthy-ori 3-1细胞系其ING4 mRNA（RT-qPCR）和蛋白（Western-Blot）的表达情况。结果1.甲状腺乳头状癌患者基线资料与甲状腺乳头状癌及其癌旁组织中组织内碘含量、ING4 mRNA和蛋白表达情况本研究共收集甲状腺乳头状癌及其癌旁组织62对,其中男性25例、女性37例,平均年龄为43.307（43.307±15.519）岁,肿瘤平均长径为2.203（2.203±0.70）cm。ICP-MS检测结果显示:甲状腺乳头状癌组织内碘含量（中位数为29.647μg/g）较其对应的癌旁组织（中位数为869.610μg/g）均存在不同程度的降低,差异具有统计学意义（P<0.001）。RT-qPCR结果显示:甲状腺乳头状癌中ING4 mRNA表达均较其对应的癌旁组织有不同程度的下调,差异具有统计学意义（P<0.001）。Westem-Blot结果显示:甲状腺乳头状癌组织ING4蛋白表达量较其对应的癌旁组织均有不同程度的降低,差异具有统计学意义（P<0.001）。2.不同浓度KIO3暴露对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞系、人甲状腺正常细胞Nthy-ori 3-1细胞系细胞活力、ING4 mRNA和蛋白表达的影响CCK8法结果显示:在相同暴露时间下,Nthy-ori 3-1细胞和TPC-1细胞仅有10-3M KIO3处理组细胞活力始终受到抑制且差异具有统计学意义（P<0.05）。在相同浓度KIO3暴露下,随着暴露时间的延长Nthy-ori 3-1细胞和TPC-1细胞其细胞活力均在一定程度上呈现“先升后降”的趋势,且在该趋势下无论是Nthy-ori 3-1细胞还是TPC-1细胞均存在10-6M和10-10M KIO3处理组细胞活力始终增强的现象。进一步对两细胞系在相同浓度KIO3不同暴露时间下比较发现,Nthy-ori 3-1细胞与TPC-1细胞在KIO3暴露24小时和48小时后两细胞系细胞活力间具有统计学差异（P均<0.05）。RT-qPCR结果显示:Nthy-ori 3-1细胞中,所有浓度KIO3处理组ING4 mRNA的表达量均较对照组有不同程度的上调,但差异无统计学意义（P>0.05）。而TPC-1细胞仅在10-6M和10-10M KIO3处理组较对照组ING4 mRNA表达下调,且10-6M KIO3处理组较对照组间具有统计学差异（P<0.05）。无论KIO3暴露浓度的高低,Nthy-ori 3-1细胞中ING4 mRNA的表达量均较TPC-1细胞ING4 mRNA高且具有统计学差异（P<0.01）。Westem-Blot结果显示:在Nthy-ori 3-1细胞中,不同浓度KIO3暴露下各处理组较对照组ING4蛋白表达量升高,10-7M（适碘水平）与10-10M（低碘水平）KIO3处理组均与对照组间差异具有统计学意义（P<0.05）。在TPC-1细胞中各KIO3处理组ING4蛋白表达量较对照组差异均无统计学意义（P>0.05）。进一步对同一浓度KIO3处理组的两细胞系比较发现,Nthy-ori 3-1细胞中ING4蛋白的表达与TPC-1细胞间差异无统计学意义（P>0.05）。结论1.本研究结果显示甲状腺乳头状癌组织中内碘含量、ING4 mRNA和蛋白表达量均明显低于其癌旁组织。2.碘酸钾暴露24小时后,10-7（适碘水平）、10-10M（低碘水平）KIO3能够促进人甲状腺正常细胞中ING4蛋白的表达。3.甲状腺乳头状癌细胞在不同浓度KIO3的刺激下,ING4 mRNA的表达量均低于人甲状腺正常细胞,而大部分浓度(除10-9、10-10M)KIO3暴露下人甲状腺正常细胞中ING4蛋白的表达量均较低于甲状腺乳头状癌细胞。
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