肝癌是我国的高发恶性肿瘤之一,不易被早期诊断,进展迅速,术后容易复发、转移,因此预后较差。蜂毒(Bee venom)是工蜂通过螫针排出的毒汁,传统医学应用蜂毒治疗类风湿性关节炎、肿瘤、皮肤病等疾病,但存在成分复杂,毒副反应比较大等缺点。蜂毒素(Melittin)是蜂毒的主要成分,是由26个氨基酸组成的多肽。本课题建立人肝癌HepG-2细胞株的体内模型,通过观察Melittin对荷瘤裸鼠药效学、免疫学指标及细胞凋亡的影响,初步探讨了Melittin的作用机制,为将其开发为抗肿瘤的新药提供试验依据。主要研究内容如下:1. Melittin对人肝癌细胞HepG-2裸鼠移植瘤的抑制作用蜂毒素(2、4mg/kg)对裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制作用,具有较高的抑瘤率,显著抑制裸鼠皮下移植瘤的体积,且随着给药浓度的增加,抑制作用逐渐加强。移植瘤组织形态学显示,蜂毒素剂量组瘤组织排列疏松,组织瘤细胞异型性明显减小。2. Melittin体内抗肿瘤作用机制的初步研究2.1 Melittin对荷瘤裸鼠免疫功能的影响Melittin(2、4mg/kg)能增高荷瘤裸鼠的脾脏指数,可显著降低荷瘤小鼠升高的NO水平,提高荷瘤小鼠TNF-α及IL-1的水平,并且呈一定的剂量依赖关系;Melittin显著增加了PMΦ的吞噬能力,提高了荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性;可使荷瘤裸鼠低下的ConA诱导的淋巴细胞增殖反应增强。提示: Melittin抗肿瘤作用可能与增强荷瘤小鼠免疫功能有关。2.2 Melittin诱导裸鼠移植瘤组织细胞凋亡采用TUNEL法原位检测移植瘤细胞凋亡,结果显示,Melittin(2、4mg/kg)能显著提高移植瘤组织细胞的凋亡指数,出现典型的凋亡特征。结论:Melittin抗肿瘤作用可能与诱导肿瘤组织细胞凋亡有关。