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目的：研究ZEB1对上皮间质转化及ESRP1表达的调控机制。方法：1.用TGF-β诱导常规培养的肺癌A549细胞,通过Western Blotting试验,检测相关标志物如ZEB1、ESRP1、E-cadherin、N-cadherin和fibronectin的变化。用慢病毒LV-ZEB1-siRNA和LV-NC-siRNA感染A549细胞,分四组：LV-ZEB1-siRNA组、LV-NC-siRNA组和用TGF-β刺激48h后再感染LV-ZEB1-siRNA组、LV-NC-siRNA组,Western Blotting试验检测ESRP1、 E-cadherin、N-cadherin和fibronectin的变化；划痕试验和侵袭试验检测ZEB1沉默对细胞运动能力的影响。2.构建ZEB1真核表达载体,转染A549细胞,Western Blotting试验检测空白对照组(未转染)、实验组(转染pcDNA3.1/myc-His-ZEB1)和阴性对照组(转染空载体pcDNA3.1/myc-His)中ESRP1、E-cadherin、N-cadherin和fibronectin的变化；划痕试验和侵袭试验检测ZEB1高表达对细胞运动能力的影响。为进一步研究ZEB1对ESRP1的调节,构建ESRP1荧光素酶报告基因载体pGL4.17-ESRP1,将重组质粒pGL4.17-ESRP1和pcDNA3.1/myc-His-ZEB1及内参质粒共转染A549细胞,48h后测定实验组(重组质粒pGL4.17-ESRP1和pcDNA3.1/myc-His-ZEB1及内参质粒共转染)、阴性对照组(重组质粒pGL4.17-ESRP1和空质粒pcDNA3.1/myc-His及内参质粒共转染)和阳性对照组(共转染6h换液后加入TGF-β刺激)的荧光素酶活性。结果：1.(1)经TGF-β(5ng/ml)刺激后,A549细胞发生EMT, E-cadherin和ESRP1表达减少；N-cadherin、fibronectin和ZEB1表达增加。感染ZEB1-siRNA与感染NC-siRNA的细胞相比,ZEB1蛋白的表达受到明显抑制；而且感染ZEB1-siRNA的细胞,TGF-β刺激导致的上皮标志物E-cadherin和ESRP1的表达减少被逆转；而间质标志物N-cadherin和fibronectin的表达增加未受明显影响。(2)划痕试验：与阴性对照组相比,TGF-β组划痕大部分愈合(P<0.05); TGF-β刺激后,ZEB1沉默组较阴性对照组迁移速度明显偏慢(P<0.05)。(3)侵袭试验：与阴性对照组相比,TGF-β刺激后穿膜细胞明显增多(P<0.05); TGF-β刺激后,ZEB1沉默组穿膜细胞明显减少(P<0.05)。2.(1)空白对照组、阴性对照组蛋白表达无明显差异；转染pcDNA3.1/myc-His-ZEB1组与这两组相比,ZEB1蛋白的表达明显增多,且上皮标志物E-cadherin和ESRP1的表达减少,而间质标志物N-cadherin和fibronectin的表达未受明显影响。(2)划痕试验：阴性对照组与空白对照组比较没有显著差异(P>0.05);pcDNA3.1/myc-His-ZEB1组与这两组比较,迁移速度较快(P<0.05)。(3)侵袭试验：阴性对照组与空白对照组比较没有显著差异(P>0.05)；pcDNA3.1/myc-His-ZEB1组与这两组比较,穿膜细胞明显增多(P<0.05)。(4)荧光素酶试验：阴性对照组ESRP1启动子相对荧光素酶活性为0.49+0.038μm,实验组为0.32+0.063μm,阳性对照组为0.21+0.030μm,说明ZEB1可抑制ESRP1的启动子活性。结论：1. TGF-β可诱导A549细胞发生EMT。2.ZEB1表达下调,可使TGF-β刺激导致的上皮标志物E-cadherin和ESRP1的表达减少被逆转；间质标志物N-cadherin和fibronectin的表达增加未受明显影响。ZEB1表达增多,可使上皮标志物E-cadherin和ESRP1的表达减少,而间质标志物N-cadherin和fibronectin的表达未受明显影响。ZEB1可部分抑制EMT过程。3.ZEB1表达下调可降低A549细胞的迁移能力和侵袭能力,ZEB1高表达可促进A549细胞的迁移能力和侵袭能力,ZEB1可能在恶性肿瘤细胞侵袭过程中发挥重要作用。4.ZEB1高表达后ESRP1的相对荧光素酶活性降低,ZEB1可能通过结合ESRP1的启动子调节其转录活性。