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目的通过急性肝炎模型,探讨醋柴胡对大黄酸增效以及体内分布的影响,确定醋柴胡是否通过影响HNF1α、HNF4α达到肝靶向增强作用及醋柴胡引经作用的上游调控靶点;通过测定各组动物肝组织药物转运蛋白及代谢酶活性的变化,初步确定醋柴胡肝靶向增强作用下游调控靶点;通过不同部位肝靶向增强作用研究,初步确定醋柴胡肝靶向增强作用活性部位。方法1)醋柴胡水提液联合大黄酸对急性肝损伤的药效及机制探讨:预防给药6天后,腹腔注射脂多糖(LPS)制作急性肝损伤模型,于4.5 h后采集血浆和组织样品,计算肝脏指数、测定血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肝脏中超氧化物歧化酶的活性以及相关炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α、INF-γ)的含量,综合评价醋柴胡联合大黄酸治疗急性肝损伤的作用;测定各组大鼠肝脏中肝核因子(HNF1α/HNF4α)的表达,肝脏中转运蛋白Pgp、Mrp2、OAT2、OATP2蛋白水平的表达,探讨醋柴胡是否通过影响肝核因子的活性影响转运蛋白的活性进而实现增强大黄酸肝靶向的作用。2)醋柴胡不同部位对大黄酸组织分布的影响:大黄酸、大黄酸+醋柴胡多糖、大黄酸+醋柴胡正丁醇部位、大黄酸+醋柴胡小分子部位分别给大鼠灌胃,单次给药在不同时间点采集血浆和组织样品、连续给药后在达峰时间采集血浆和组织样品,测定组织中大黄酸含量、肝组织中肝核因子(HNF1α/HNF4α)和ATP酶的含量。结果1)醋柴胡水提液联合大黄酸对急性肝损伤的疗效和机制探讨:与正常组相比,模型组血浆中AST,ALT的含量显著升高,肝脏中HNF1α/HNF4α的含量下降,外排型转运蛋白Pgp、Mrp2的蛋白表达显著上调,OATP2、OAT2的蛋白表达有所下降;与模型组相比,大黄酸+醋柴胡低剂量可显著降低血浆中AST、ALT的含量,增加肝脏中SOD、ATP酶的活性;与大黄酸组相比,醋柴胡低剂量可增加大黄酸在肝脏中的药物浓度;并且可促进HNF1α/HNF4α的表达;还可抑制外排型转运蛋白Pgp、Mrp2的蛋白表达,促进摄取蛋白OATP2和OAT2的蛋白表达。2)醋柴胡不同部位对大黄酸在正常动物组织分布的影响:在单次给药实验中,醋柴胡各部位均可增加大黄酸在肝脏中的分布;多次给药实验中,醋柴胡多糖和小分子部位可显著增加大黄酸的肝内分布;单次给药中醋柴胡小分子部位、多糖部位显著增加了大黄酸的峰浓度,三个部位均显著延缓了大黄酸的肝内清除,以相对摄取率作为评价指标,醋柴胡小分子、醋柴胡多糖、醋柴胡正丁醇部位分别增加93%、60%和50%;以相对靶向效率为评价指标,三个部位分别增加49%、49%和30%,醋柴胡小分子部位有促进II相代谢酶的表达的趋势,三个部位均具有促进HNF1α/HNF4α活性的趋势,其中30 min时间点小分子部位具有显著性;多次给药实验中醋柴胡多糖部位和小分子部位具有增加大黄酸的肝血比的作用,分别增加39%、33%;醋柴胡三个部位均有促进摄入型转运蛋白OAT2、OATP2表达的趋势,其中小分子部位显著促进OAT2的表达;三个部位均有抑制Mrp2表达的趋势;三个部位均有促进肝核因子表达的趋势。但是醋柴胡各部位对肝脏中ATP酶的活性影响不大。结论本文以LPS诱导的急性肝炎模型证实醋柴胡对大黄酸具有增效作用,这种增效作用与其增强大黄酸肝靶向的作用相关;机制研究初步证实醋柴胡可通过促进动物肝脏HNF1α/HNF4α的表达,进而影响药物转运蛋白Mrp2、Pgp、OAT2、OATP2发挥肝靶向作用;醋柴胡三个部位均具有肝靶向增强作用,为其活性部位。