VA、VD对两种规格斜带石斑鱼生长、饲料利用、脂肪代谢及FAS、HL mRNA表达量的影响研究

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本实验研究对象为斜带石斑鱼,分两种规格(第一阶段7.40g±0.03,幼鱼;第二阶段81.50g±0.05,中鱼)进行试验。本实验在广东海洋大学东海岛生物基地室内海水养殖系统的钢化玻璃桶内进行,养殖水温28.5-31.5℃,pH 7.5-8.0,盐度26-30。旨在研究饲料维生素A(Vitamin A,VA)、维生素D(Vitamin D,VD)水平对两种规格斜带石斑鱼生长、饲料利用、免疫酶活性、肝脏脂肪代谢酶活性及其mRNA表达量的影响。结果如下:1.本研究采用白鱼粉、明胶和酪蛋白(去维生素)为主要蛋白源,鱼油、玉米油和磷脂油为主要脂肪源,配制VA添加水平分别为0,1 000,2 000,4 000,8 000和20 000IU/kg的6组实验饲料。养殖周期均为10W。结果表明:对于生长和饲料利用的结果分析可见,饲料VD添加水平增加,两种规格实验鱼的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)均呈现先升后降的趋势(P<0.05)。幼鱼阶段,在2 000IU组WGR最高,显著高于对照组和20 000IU组(P<0.05);中鱼阶段,WGR在1 000IU组最高,与2 000IU组差异不显著(P>0.05),但显著高于其余各组(P<0.05),且对肥满度(FC)影响显著(P<0.05),1 000IU组FC最高,总体呈现先升后降趋势(P<0.05);成活率的变化,幼鱼阶段,当VA添加水平为20000IU/kg时,其成活率显著降低(P<0.05),但HIS变化不显著(P>0.05);中鱼阶段,成活率和HIS均不受VA水平的影响(P>0.05);对体成分分析结果为,VA水平对两种规格的全鱼水分、粗蛋白(CP)、粗脂肪(CF)和粗灰分(CA)含量无显著影响(P>0.05),但在中鱼实验中,随VA水平的增加肝脂肪沉积量呈先升后降,后趋于稳定(P<0.05);对免疫指标结果分析可见,两阶段实验中,VA水平显著提高血清和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),但对血清碱性磷酸酶(AKP)活性影响不显著(P>0.05);在中鱼实验中,VA显著降低血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05),显著提高血清谷草转氨酶(AST)活性(P<0.05);血清生化指标测定结果为,在两种规格鱼的实验中,血清胆固醇(CHOL)显著降低(P<0.05),而甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量随VA水平增加呈先升后降趋势(P<0.05),在1 000IU组时,两实验阶段的TG含量最高,并且在中鱼实验中,LDL-C含量最高;肝脏酶活性指标测定结果为,在两阶段实验中,VA水平显著影响石斑鱼肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)活性(p<0.05),幼鱼实验,当va为2000iu组时,fas、lpl活性最高,但fas活性2000组和8000组无显著性差异(p>0.05),而对于hl活性,两实验均在4000iu组时最高(p<0.05);中鱼实验,fas、hsl活性在8000iu组最高,lpl活性在4000iu组最高,而棕榈酸酯酰转移酶(cpt-1)活性受va水平影响显著(p<0.05);肝脏va沉积量随饲料va水平增加而显著升高(p<0.05);缺乏或过量添加va显著抑制fas和hlmrna表达,添加适量va显著促进fas和hlmrna表达(p<0.05)。综上可知,在本实验中,以生长性能、饲料系数和免疫酶活性为判断依据,va是斜带石斑鱼生长、健康的必需营养素,当饲料中添加1000iu-2000iu/kgva时,斜带石斑鱼的生长性能、饲料利用和免疫功能达到最高值。以血清生化指标、脂肪代谢酶活性、肝脏va沉积量和fas、hlmrna表达量为判断依据,在va添加量为2000iu-4000iu/kg时脂类分解代谢得到显著提高,显著高于对照组和20000iu组(p<0.05),从而可有效提高和改善斜带石斑鱼脂肪代谢,防止因脂肪沉积过多而引起病变。2.本研究采用白鱼粉、明胶和酪蛋白(去维生素)为主要蛋白源,鱼油、玉米油和磷脂油为主要脂肪源,配制含vd添加水平分别为0,500,1000,2000,4000和10000iu/kg的6组实验饲料。养殖周期均为10w。结果表明:对生长和饲料利用的影响表现为:饲料vd添加水平对其有显著影响(p<0.05);幼鱼实验,当vd添加为1000iu/kg时,wgr和饲料利用最高(p<0.05);而中鱼实验,当vd添加为500-1000iu/kg时,wgr最高,但vd水平对fc的影响不显著(p>0.05);成活率结果则不受vd水平的影响(p>0.05);his和成活率呈现相同的变化规律。对于体成分分析结果为,幼鱼阶段,全鱼体cp、cf和ca均不受vd水平影响(p>0.05);中鱼阶段,全鱼体cp受vd水平影响显著(p<0.05),1000iu组最高;而cf和ca则不受vd水平影响(p>0.05),但随vd水平增加,肝脏脂肪含量呈现先降后升趋势,在4000iu组最低(p<0.05);血清中酶活性测定结果为,幼鱼阶段,在vd水平为4000iu组akp活性最高,1000iu组sod活性最高(p<0.05);中鱼阶段,akp、sod活性则不受vd水平影响(p>0.05);肝脏中免疫指标测定结果为,幼鱼阶段,肝脏sod活性随vd水平增加而呈先升后降趋势(p<0.05);中鱼阶段,肝脏sod活性不受添加vd水平的影响;但显著降低血清mda含量和acp活性(p<0.05);血清生化指标测定结果为,幼鱼阶段,chol和ldl-c含量不受vd水平影响(p>0.05),但tg含量随vd水平增加呈现逐渐降低趋势(p<0.05),而hdl-c含量则呈先降低后升高趋势;中鱼阶段,tg、hdl-c和ldl-c变化趋势与幼鱼阶段相同,但chol含量随vd水平变化呈现逐渐降低趋势,对照组含量最高(p<0.05);肝脏酶活性测定结果为,幼鱼阶段,vd水平显著降低fas活性,并且促进总脂酶(lpl和hl活性总和)活性(p<0.05);中鱼阶段,FAS和总脂酶活性变化趋势与幼鱼阶段相同,且随着VD水平增加,HSL活性显著提高(P<0.05),而CPT-1活性则降低(P<0.05);mRNA表达量测定结果为,随饲料VD水平增加FAS和HL mRNA表达量变化趋势相似,均呈现先升后降趋势(P<0.05);肝脏VD沉积量测定结果为,随饲料VD水平增加两实验阶段,肝脏VD沉积量均呈指数型增加。综上可见,本实验中,以生长性能和饲料利用为判断依据,对于两种规格斜带石斑鱼,当饲料VD添加水平为1 000IU/kg时,生长最好;以FAS、LPL、HL、HSL等酶活性为判断依据,饲料VD水平在2 000IU/kg时,对斜带石斑鱼脂肪分解有显著改善作用;以FAS、HL mRNA表达量为判据,VD水平为1 000-2 000IU/kg时最佳。结果表明,当饲料VD添加水平为1000-2000IU/kg时,两种规格斜带石斑鱼的脂肪分解调节效果最佳,能显著减少脂肪在肝脏中的沉积。
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