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第一部分：CTLA—4基因多态性与Vogt—小柳原田综合征的相关性研究
目的：Vogt—小柳原田(Vogt—Koyanagi—HaradaSyndrome，VKH)综合征是一种累及全身多个系统、多个器官的自身免疫性疾病，典型表现为双眼的全葡萄膜炎、白癜风、脱发、毛发变白以及中枢神经系统症状。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原—4(cytotoxicTlymphocyte—associatedantigen—4，CTLA—4)是一T细胞介导免疫反应的负性调节因子，研究发现其基因多态与多种自身免疫性疾病相关。本实验的目的是探讨CTLA—4基因的4个单核甘酸多态(SingleNucleotidePolymorphism，SNP)与中国汉族人群VKH综合征的相关性。
方法：选择中国汉族人群209例VKH综合征患者和256例健康对照者，采集外周静脉血2-5ml，抗凝处理，提取基因组DNA，运用聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction，PCR)—限制性片段长度多态性(RestrictionFragmentLengthPolymorphism，RFLP)的方法，检测CTLA—4基因的4个SNP位点(-1661A/G，rs4553808；—318C/T，rs5742909；+49G/A，rs231775；及CT60，rs3087243)，用SPSS10.0软件进行统计学分析，探讨上述4个SNP的多态性与中国汉族人群VKH综合征的相关性；用Haploview3.32软件以这4个SNP位点构建CTLA—4基因单倍体型，并比较VKH综合征和健康对照两人群中CTLA—4个单倍体型的频率差异。
结果：
1.CTLA—4基因+49G/A位点的G等位基因在VKH综合征患者中的频率显著高于健康对照(71.6％vs62.8％，p=0.0046，pcorrected=0.037，OR=1.141)；该多态位点的基因型在VKH综合征患者和健康对照中的频率无差异(p=0.01，pcorrected=0.12)。
2.CTLA—4基因CT60位点的G等位基因在VKH综合征患者中的频率较健康对照组升高(81.8％vs76.4％，p=0.043)，但经Bonferroni校正后差异无统计学意义；该多态位点基因型的频率在VKH综合征患者和健康对照中的差异无统计学意义(p=0.016，pcorrected=0.192)。
3.CTLA—4基因-1661A/G位点和—318C/T位点的等位基因及基因型频率在VKH综合征患者与健康对照中频率的差异无统计学意义。
4.利用Haploview3.32软件以这4个位点构建CTLA—4基因单倍体型，有3个单倍体型的频率在VKH综合征患者和/或健康对照中大于3％。单倍体型-1661A：—318C：+49G：CT60G在VKH综合征患者和健康对照组中的频率均最高，并且该单倍体型在VKH综合征患者中的频率显著高于健康对照组(70.1％vs60.0％，p=0.0013，pcorrected=0.021，OR=1.565)。单倍体型-1661A：—318C：+49A：CT60A在VKH综合征患者中的频率较健康对照低，但经Bonferroni校正后差异无统计学意义(15.7％vs21.2％，p=0.0349，porrected=0.584，OR=0.701).
结论：CTLA—4基因SNP+49G/A位点的G等位基因和CTLA—4单倍体型-1661A：—318C：+49G：CT60G与VKH综合征的易感性相关，提示CTLA—4的多态性与中国汉族VKH综合征易感性相关。
第二部分：CTLA—4基因多态性与Behcet病的相关性研究
目的：Behcet病是一种自身免疫性疾病，典型表现为复发性口腔溃疡、生殖器溃疡和复发性葡萄膜炎三联征和皮肤病变的，是我国最常见和最重要的致盲性葡萄膜炎之一。本实验的目的是探讨CTLA—4基因的4个SNP与中国汉族人群Behcet病的相关性，并利用荟萃分析(meta—analysis)探讨CTLA—4基因SNP+49G/A位点多态性与Behcet病的相关性。
方法：选择汉族人群228例Behcet病患者和207例健康对照者，采集外周静脉血2-5ml，抗凝处理，抽提基因组DNA，运用PCR—RFLP检测CTLA—4基因的4个SNP位点(-1661A/G，rs4553808；—318C/T，rs5742909；+49G/A，rs231775；和CT60，rs3087243)，用SPSS10.0软件进行统计学分析，探讨上述4个SNP的多态性与汉族人群Behcet病的相关性；用Haploview3.32软件以者这4个SNP位点构建CTLA—4单倍体型，并在Behcet病和健康对照两人群中比较CTLA—4个单倍体型频率的差异。检索CTLA—4基因多态与Behcet病相关性研究的文献，利用荟萃分析评价CTLA—4基因SNP+49G/A位点多态性与Behcet病的相关性。
结果：
1.CTLA—4基因4个SNP多态(-1661A/G、—318C/T、+49G/A和CT60)的等位基因频率和基因型的频率在中国汉族Behcet病患者和健康对照组中的差异无统计学意义。
2.利用Haploview3.32软件以这4个位点构建CTLA—4基因单倍体型，有3个单倍体型的频率在Behcet病患者和/或健康对照中大于3％。单倍体型-1661A：—318C：+49G：CT60G在Behcet病患者和健康对照组中的频率均最高，但各个单倍体型的频率在Behcet病患者中与健康对照组的差异无统计学意义。
3.根据Medline检索的3篇关于CTLA—4基因SNP+49G/A多态与Behcet病相关性研究的文献数据以及本实验的数据，荟萃分析结果显示所有4个实验结果无异质性(p=0.60，I2=0％)，CTLA—4基因SNP+49G/A多态性与Behcet病无相关性(overalleffects：Z=0.26，p=0.79)，集合危险系数(pooledOR)为0.98(0.83-1.15)。
结论：实验研究提示CTLA—4基因多态性与汉族Behcet病无相关性。荟萃分析结果显示CTLA—4基因+49G/A位点的多态性与Behcet病无相关性。