基于一维铜金属有机骨架检测平台的构建及相关miRNAs的检测

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sbb20005
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目的:  金属有机骨架(Metal-Organic Frameworks,MOFs)是由无机金属离子或金属簇与有机配体配位并自组装构筑形成的新型有机无机杂化材料。据文献报道,具有良好水稳定性的MOFs可应用于核酸分子检测领域中。本次研究主要目的就是构建一维Cu(Ⅱ)MOF{[Cu2(Cbdcp)2(bipy)(H2O)4]·2H2O}n(1,Cbdcp=N-(4-carboxybenzyl)-(3,5-dicarboxyl)pyrid inium;bipy=4,4-bipyridine)与两种荧光标记的P-DNA结合形成P-DNA-1@1和P-DNA-2@1检测平台,用于乳腺癌相关miRNAs的检测。  方法:  1.用H3CbdcpBr(Cbdcp=N-(4-carboxybenzyl)-(3,5-dicarboxyl)pyridinium)与金属Cu(Ⅱ)反应,成功构建新型MOFs,{[Cu2(Cbdcp)2(bipy)(H2O)4]·2H2O}n,并通过红外光谱,元素分析和X-射线单晶衍射等表征结构。  2.将MOFs与两种荧光标记的P-DNA结合形成P-DNA-1@1和P-DNA-2@1检测平台,对乳腺癌相关的miRNA-221和miRNA-222进行单独检测。  3.采用有机金属骨架联合恒波长同步荧光扫描技术对miRNA-221和miRNA-222进行同步检测。  结果:  采用单荧光法检测,荧光淬灭率分别为83%和53%,该检测平台能够成功实现对乳腺癌相关的miR-221和miR-222的单独检测,检测时间分别是1.8min和2.6min,检测限分别为166pM和141pM。采用同步荧光法进行同时检测,荧光淬灭率分别为70.9%和77.7%,检测时间分别是4.7min和8.5min,检测限分别为231pM和977pM。  结论:  MOFs制备过程简便且具有良好水溶性与水稳定性,MOFs构筑的检测平台能够快速,高灵敏性,高特异性地检测出目标miRNAs,且不存在交叉反应,有望为临床检验提供一种新的检测技术。
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