新的肿瘤相关基因1A6的功能研究--1A6的原核表达、抗1A6单克隆抗体的制备;1A6蛋白的细胞内定位;1A6在多种不同来源的肿瘤组织中表达谱的检测及其与肿瘤的相关性研究

来源 :北京医科大学 北京大学医学部 北京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:peggy721
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该文采用原核表达的方法,构建了原核表达载体pGEX1893,获得了纯化的融合蛋白GST-1A6.将纯化的GST-1A6分别免疫昆明鼠和Balb/c鼠以制备多克隆抗血清及单克隆抗体.应用杂交瘤技术,筛选出2株单克隆抗体2E4和6D9.应用免疫组织化学及免疫荧光技术,将1A6蛋白定位于胞核及核仁区.应用免疫组织化学技术检测了1A6在多种细胞系中的表达谱.结果表明,1A6在多种肿瘤细胞均有表达而在相对正常的GES-1细胞中没有表达.应用免疫组化技术检测了1A6在5种肿瘤组织中的表达谱,其阳性率分别为:乳癌:85%(24/28);胃癌:63.6%(21/33);食道癌:50%(4/8);肝食道、肝及肺均不表达1A6蛋白.通过该文对1A61功能的初步研究,研究人员可以得出的结论是:A6是一个新的原癌基因;1A6蛋白是一个新发现的核及核仁蛋白;1A6表达的激活与肿瘤相关.
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