【摘 要】
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目的:探讨血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative,HPD）介导的光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）对小细胞肺癌H446细胞与支气管上皮BEAS-2B细胞的增殖抑制作用,并为光动力疗法在肺癌的临床治疗上提供一定的实验依据和理论支持。方法:将小细胞肺癌H446细胞与支气管上皮BEAS-2B细胞分别和不同浓度血卟啉衍生物（0、5、10、12、15和
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目的:探讨血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative,HPD）介导的光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）对小细胞肺癌H446细胞与支气管上皮BEAS-2B细胞的增殖抑制作用,并为光动力疗法在肺癌的临床治疗上提供一定的实验依据和理论支持。方法:将小细胞肺癌H446细胞与支气管上皮BEAS-2B细胞分别和不同浓度血卟啉衍生物（0、5、10、12、15和20 ug/ml）孵育4小时后,分别给予不同功率密度（0、25、50、75和100 m W/cm2）的630 nm激光照射2分钟,同时设有单纯光照组、单纯光敏剂组和空白对照组。利用CCK8法检测H446细胞与BEAS-2B细胞的存活率,Hoechst 33258染色法对细胞进行染色,并观察H446细胞和BEAS-2B细胞的变化,Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡。RT-PCR检测H446细胞和BEAS-2B细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2和Caspase-9 m RNA的表达水平。结果:（1）CCK8结果显示单独给予血卟啉衍生物孵育或者630 nm激光照射对小细胞肺癌H446细胞和支气管上皮BEAS-2B细胞的生长均无明显抑制作用,HPD-PDT对H446细胞与BEAS-2B细胞的生长有显著的抑制效果,HPD-PDT对小细胞肺癌H446细胞的抑制作用更明显。当激光功率密度达到50 m W/cm2时,H446细胞和BEAS-2B细胞的活力比空白对照组的细胞活力明显下降（P<0.05）,继续增加光照强度对其抑制效果的增加有限,光敏剂浓度达到15 ug/ml和20 ug/ml时,PDT组细胞活力与对照组相比明显降低,差异均提示有统计学意义（P<0.05）。选取激光功率密度50 m W/cm2和光敏剂浓度15 ug/ml为后续实验条件。（2）Hoechst 33258染色显示H446细胞与BEAS-2B细胞的HPD-PDT组可见明显的凋亡细胞。凋亡细胞的染色质固缩,细胞核致密,随着HPD浓度的增加,凋亡细胞数量增加,细胞密度降低,空白对照组、单纯光敏剂组和单纯光照组未见明显凋亡细胞,与BEAS-2B细胞相比,H446细胞凋亡得更多,细胞密度降低更明显。（3）Annexin V-FITC/PI双染法检测到小细胞肺癌H446细胞和支气管上皮BEAS-2B细胞HPD-PDT组的细胞总凋亡率分别为（46.73±1.38）%,（28.56±1.80）%,与其他三组相比明显增高,差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）RT-PCR数据显示了H446细胞和BEAS-2B细胞的HPD-PDT组细胞Bax和Caspase-9 m RNA的相对表达量均明显增加,Bcl-2 m RNA相对表达量明显降低,组间差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:HPD-PDT对小细胞肺癌H446细胞与支气管上皮BEAS-2B细胞的增殖均有抑制作用,HPD-PDT作用的最佳光敏剂浓度为15 ug/ml,最佳激光功率密度为50m W/cm2,与BEAS-2B细胞相比,HPD-PDT对H446细胞的抑制作用更加明显,其抑制作用可能与上调Bax和Caspase-9 m RNA的表达以及下调Bcl-2 m RNA的表达相关。
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