前言 周围神经损伤造成神经缺损是临床常见的外伤，自体神经移植已成为一种主要的解决方法，但是由于神经再生不全影响功能恢复，特别是移植的自体神经来源有限，供区局部会引起神经疼痛，麻木，瘢痕等并发症。由此学者进行了大量异体神经替代自体神经移植的实验研究，但由于异体神经免疫排斥反应，结缔组织增生导致神经再生失败。目前多认为低温冷冻神经降低其抗原性是解决其办法之一，但仍存在一些神经再生不全的问题。本实验组构想是在低温冷冻神经降低其抗原性基础上在神经损伤局部应用bFGF复合缓释降解膜(缓释降解膜，bFGF和降低vitaminC浓度试剂)使神经再生快于受体免疫排斥反应和结缔组织增生，从而能提高神经再生效果。 实验材料 1．实验动物：中国医科大学动物饲养中心饲养的SD大鼠雌雄兼有共54只，体重350-500克。 2．主要仪器： (1)肌电图仪：CantataTM／200丹迪公司 (2)图象分析仪：Leca DMLB (3)电镜：H——7100日立电镜 (4)深低温冰箱FORMA MODEL 925 3．主要试剂：bFGF复合缓释降解膜：由中国科学院成都化学研究所协制 实验方法 l．将m大鼠54只，共分三组，右下肢坐骨神经切除Zcm神经段，一方面把切下来的这段神经，经一80℃深低温冰箱内冷存10天作为供体异体神经移植用，另一方面将事先经冷冻处理好的异体神经（供体）缝接到坐骨神经被切除Zcm处。A组：将经过bFGF和降低维生素C浓度试剂处理的供体神经段缝接到坐骨神经缺损处，并在缝接处包裹bFGF复合降解膜。B组在异体神经移植处包裹不合药的降解膜，而C组仅作异体神经移植，局部不包任何膜。术后90d和180d，进行光，电镜下组织结构变化观察，图象分析仪测定，血神经屏障结构变化，电生理测试，粘连定量观察等。 2．统计学方法：应用STATISTICAS．0软件行t检验，方差分析。 实验结果 1．肉眼观察：术后不同时期的A组神经移植段，多较B与C两组的粗和表面光滑，神经移植段与远、近端神经缝合处略显膨大，与外周结缔组织连续程度等，均较B与C两组的小而轻。 2．镜下观察：在髓鞘染色横断面切片标本上月见有髓神经纤维的髓鞘被饿酸和wed氏液染成大小不等，薄厚不一的黑色和深兰色圈状。A组神经移植段与远段的有髓神经纤维，在数量上和直径上均明显较B和C两组的多而粗，髓鞘着色也较深入与C两组的神经远段有髓神经纤维未见明显差异。在3组透射电镜切片上，3组的神经髓鞘尚未完全成熟至正常程度，但A组髓鞘的发育程度明显好于B与C两组。 ·2· 3．血一神经屏障观察：各组神经移植段的神经外膜和束膜处，均显HRP阳性反应，着棕黄色。3组间主要不同反应：①术后90d A组神经移植段只有少量神经纤维间出现HRP弱阳性反应，着淡棕黄色，大部分神经纤维间均呈HRP阴性反应，而着甲苯胺兰复染的兰色人与C两组与A组的相反，大部神经纤维间依然为HRP阳性反应，只有少量神经纤维间为阴性。②待术后180d，A组神经移植段的神经纤维间几乎均当阴性反应，而B组与C组在神经纤维间尚有HRP阳性反应着淡黄色存在。表明A组的血一神经屏障恢复快于其它两组。 4．图像分析仪测定：术后180d各组神经近段与神经远段的有髓神经纤维数量测定表明人组的再生有髓神经纤维较B组的明显多瞩＜o．＊1）而B组与C组的再生有髓神经纤维，无显著差异口＞O．N）表明含药的复合降解膜有促进神经再生的作用。术后180d各组有髓神经纤维直径的测定（p叫表明含药复合降解膜的A组，其再生有髓神经纤维发育成熟均优于其它两组。 5．神经与外周粘连定量测定：术后90d各组神经近端缝合段周粘连定量的测定显示人组神经近端缝合段周粘连程度明显较B和C两组的轻，其结果有显著性差异K＜O．ml人 6．电生理指标的测试：术后 180 d潜伏期和波幅检测检测胖肠肌显示：①A潜伏期较 B与 C两组均短师＜0．005）表明 A组神传导明显较B与C两组的快。②A组波幅明显较B与C两组的高，说明A组的神经再生效果好。 讨论 用经冷冻处理的异体神经移植物，可降低其抗原性而获得神经再生成功，可是迄今依然由于免疫排斥，结缔组织增生干扰，致使神经再生受阻，未能取得一个突破性进展而用于临床。本实验 ·3·试图在经冷冻处理降低抗原性的异体神经移植物缝接处，置人有促进轴突生长和雪旺氏细胞分裂增殖的bFGF和抑制胶原纤维合成试剂制成bFGF复合降解膜，它可使损伤神经在降低异体神经移植物抗原性和抑制结缔组织增生条件下提高神经再生效果。 BFGF具有生物活性的多效性及神经营养的广谱性，而受到基础与临床研究的重视，并被认为可能具有广阔的临床应用前景。bFGF有促进神经再生和功能恢复的作用。许多学者用 bFGF作神经细胞培养，结果发现bFGF具有广泛的促神