田七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠的HGF及TGF-β1/Smads信号通路的影响

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目的:观察田七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠肾脏肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad6表达的影响,探讨田七注射液抗肾纤维化的作用机制。  方法:清洁级SD(Sprasue-Dawley)雄性大鼠60只,随机分为三组:对照组(n=20),模型组(n=20),田七注射液治疗组(n=20),对照组切除右肾后不注射阿霉素(ADR),予生理盐水(10ml/kg·d)腹腔注射;模型组通过切除右肾,术后第7天及术后第30天分别尾静脉注射ADR5mg/kg、3mg/kg建立阿霉素肾纤维化大鼠模型,造模后予生理盐水(10ml/kg·d)腹腔注射;田七注射液治疗组按模型组方法造模后,予田七注射液(2g/kg·d)腹腔注射给药。3组大鼠均连续给药60天后处死。处死前收集腹主动脉血和肾脏组织标本。用全自动化仪检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。肾脏病理行苏木素伊红染色(HE)、六胺银染色(PASM)和马松染色(Masson)。光镜下观察肾脏病理改变;用免疫组化法观察HGF、TGF-β1、Smad3、Smad6蛋白的表达。  结果:①一般情况:与对照组大鼠相比模型组与田七注射液治疗组大鼠活力明显减退、体重下降、畏寒、食欲差、脱毛明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。②生化检测结果:田七注射液治疗组和模型组大鼠的BUN、Scr均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,田七注射液治疗组BUN、Scr有所降低(P<0.05)。③肾脏外观及病理结果:与对照组相比,模型组的肾脏肿大,颜色变浅,有囊性感。肾脏剖面,模型组的肾脏实质明显变薄,呈囊状,颜色暗红,表面粗糙不平,有囊肿和瘢痕。缺血状,以肾皮质为重,光镜下肾小管上皮细胞扁平,细胞崩解、脱落,伴细胞再生;肾小管基膜增厚,管腔扩张,内可见细胞的崩解碎屑;肾间质可见淋巴-单核细胞浸润,伴细胞外基质(ECM)沉积;部分肾小球有新月体形成,部分肾小球出现局灶硬化;而田七注射液治疗组的肾脏病理改变明显轻于模型组;与模型组比较,田七注射液治疗组肾小球硬化指数及肾间质损伤分数明显减少(P<0.01)。④免疫组化法检测结果:与对照组比较,模型组 HGF表达显著下调(P<0.01),TGF-β1、Smad3表达显著上调(P<0.01),Smad6表达显著下调(P<0.01);与模型组比较,田七注射液治疗组肾组织HGF表达显著上调(P<0.01),TGF-β1、Smad3表达显著下调(P<0.01),Smad6表达显著上调(P<0.01)。  结论:①田七注射液可以降低阿霉素肾纤维化模型大鼠的血 BUN及Scr和肾脏病理,对肾功能具有保护作用。②田七注射液可能是通过上调HGF、Smad6,下调TGF-β1、Smad3蛋白的表达,通过抑制TGF-β1/Smads信号通路活化,从而发挥抗肾纤维化的作用。
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