目的:明确胆囊癌与正常胆囊中ARAF基因的表达差异,探讨该基因对胆囊肿瘤恶性表型的调控作用,为临床治疗该疾病提供新的理论依据。临床资料与方法:连续收集绍兴市人民医院2018年2月至9月经病理学检查证实的胆囊癌患者肿瘤组织及胆囊息肉患者息肉旁正常胆囊组织各12例。以RT-qPCR及Western blot检测两组组织中ARAF mRNA和编码蛋白的表达水平。构建ARAF siRNA组和siRNA control组胆囊癌细胞,以细胞增殖实验、增殖细胞核抗原蛋白(PCNA)检测、集落形成实验验证ARAF对其增殖能力的调控作用;以划痕实验、transwell实验验证ARAF对其迁移、侵袭能力的调控作用;以化疗耐药实验验证ARAF对其化疗敏感性的影响。最后通过建立移植瘤动物模型,研究在体条件下,ARAF异常表达对胆囊癌生长的影响。对实验数据行Student’st-检验,比较统计学差异。结果:实验结果显示,胆囊癌组织中ARAF mRNA表达水平与A-Raf蛋白含量显著高于非肿瘤组织(P<0.05)。相较siRNA control组,ARAF siRNA可有效降低胆囊癌细胞的增殖能力、PCNA蛋白表达量及集落形成数量(P<0.05);胆囊癌细胞经转染ARAF siRNA后对顺铂与吉西他滨的药物耐受能力明显降低(P<0.05);在划痕实验和transwell实验中,沉默ARAF致使胆囊癌细胞迁移和侵袭能力减弱(P<0.05)。此外,通过荷鼠成瘤实验进一步明确,ARAF siRNA组裸鼠的肿瘤体积与重量相较于对照组明显降低,这与体外实验结果一致(P<0.05)。结论:ARAF作为原癌基因在胆囊癌组织中表达上调。沉默ARAF基因能够抑制胆囊癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,增强其对化疗药物的敏感性,并抑制肿瘤细胞在裸鼠体内的生长。因此,ARAF基因可能是参与胆囊癌发生发展的原癌基因,并可作为临床治疗的潜在靶标。