本实验研究了壳寡糖不同处理工艺和不同投喂方式对仿刺参生长、免疫和消化酶以及肠道菌群的影响,同时,为更好地将壳寡糖的应用过渡到生产中,进一步研究了不同形态饲料添加壳寡糖对仿刺参生长和免疫的影响。在此基础上,筛选较合适的壳寡糖应用方案进行中试实验,对壳寡糖的应用进行可行性验证。关于壳寡糖不同处理工艺和不同投喂方式的实验方法,实验制备3种颗粒饲料:基础饲料,基础饲料添加0.5%壳寡糖,基础饲料添加1.5%包被壳寡糖饲料,其中,后两者中的壳寡糖有效含量相同。实验共分5组,设置两种实验设计。(1)实验一、壳寡糖不同处理工艺分组设置:以基础饲料为对照组(G0);1.50%包被壳寡糖添加组(G1);0.50%壳寡糖添加组(G2);(2)实验二、壳寡糖不同投喂方式分组设置:设置不同投喂方式,基础饲料连续投喂(G0);0.50%壳寡糖饲料连续投喂(G2);0.50%壳寡糖饲料和基础饲料间隔10天投喂(G3);0.50%壳寡糖饲料投喂5天,基础饲料投喂10天的间隔投喂(G4)。选用初始平均体重2.33±0.01g仿刺参进行60d的养殖实验。(1)通过试验一可以看出:与对照组相比,壳寡糖不同处理工艺对仿刺参生长性能均无显著差异(P>0.05),但各处理组的生长指标较对照组均有提高。G1组的脂肪酶和蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05),G2组较之对照组有所提高但不显著(P>0.05),各处理组淀粉酶无显著差异(P>0.05)。除NOS外,G1组的各项免疫指标均显著高于对照组(P<0.05),G2组较之对照组有所提高但不显著(P>0.05)。(2)通过实验二可以看出:与对照组相比,壳寡糖不同投喂方式对仿刺参生长性能均无显著差异(P>0.05),但各处理组的生长指标较对照组均有提高,G2组效果最佳。G2组和G3组的脂肪酶和蛋白酶显著高于对照组(P<0.05),各处理组淀粉酶无显著差异(P>0.05)。除NOS外,G2组和G3组的各项免疫指标均显著高于对照组(P<0.05)。综合实验一和实验二的结果可以看出,包被壳寡糖对仿刺参的生长性能、消化酶及非特异性免疫指标的效果最佳,但综合考虑,壳寡糖连续投喂和间隔10d投喂方式较为合适。此外,五组实验在攻毒实验上无显著差异(P>0.05),G1组的死亡率最低,对照组最高。综上,G1组的促生长和促免疫的作用最佳,G2组和G3组次之。通过高通量测序技术分析壳寡糖作为免疫增强剂对仿刺参肠道菌群的影响。结果显示:壳寡糖添加组的细菌多样性和菌落丰度均高于对照组;在肠道菌群菌门分类中,优势菌门均为变形菌门;在共有的优势菌属中,壳寡糖添加组与对照组相比,优势菌属发生较大的改变,在对照组中比例最高的为浮霉菌属,最低的为芽孢杆菌属,而壳寡糖添加组与之相反,说明壳寡糖对仿刺参肠道菌群的组成产生了影响。综上所述,仿刺参饲料中添加壳寡糖可提高肠道细菌多样性和相对丰度,促进有益菌属的增殖。不同形态饲料添加壳寡糖的实验,选用初始平均体重为2.41±0.01g的仿刺参饲喂50d。结果显示:不同形态饲料添加壳寡糖对仿刺参生长无显著影响(P>0.05),其中,仿刺参末重由高到低的次序依次是:壳寡糖粉状料组>对照粉状料组>壳寡糖颗粒料组;壳寡糖颗粒料组别的各项免疫指标均显著高于其他组别(P<0.05),壳寡糖粉状料组别的各项免疫指标均显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,壳寡糖粉状料更适合在生产中推广。结合以上壳寡糖的研究结果,对壳寡糖进行中试试验,实验结果表明,饲料中添加壳寡糖能够促进仿刺参的生长性能,并能够增强仿刺参的抗逆性。可见,壳寡糖应用在仿刺参的养殖中是可行的。