目的:探讨针药人工周期疗法改善痰湿型多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)胰岛素抵抗的作用机制及其调控胰岛素信号通路与相关基因表达的机制,为进一步优化中医药治疗痰湿型PCOS胰岛素抵抗的方案提供科学依据。方法:本课题采用前瞻、随机、对照临床研究设计,选择自2014年12月-2016年10月到福建省妇幼保健院中医科门诊就诊的符合诊断标准及纳入标准的62名PCOS患者(痰湿型)为研究对象。按照病例纳入标准随机分为治疗组(针药人工周期组)和对照组(二甲双胍组)。治疗组施予针灸、中药及二甲双胍,对照组予二甲双胍,上述两组治疗时间均为12周,随访4周。研究期间严密观察并记录不良事件及药物不良反应。安全性指标主要包括血、尿、粪常规、肝功能、肾功能、心电图。主要疗效指标包括中医症状积分、月经情况、排卵率、妊娠率、BMI、腰围、性激素水平(FSH、LH、PRL、E2、T)、血脂水平(TG、CHOL、HDL、LDL)、胰岛素抵抗指标[FPG、FINS、Ln(HOMA-IR)]、miRNA(miR-143、miR-29、let-7)和相关靶基因(INSR、IRS、PI3K、AKT、ERK1、ERK2)转录水平、胰岛素信号通路相关蛋白(INSR、IRS、PI3K、AKT、ERK1、ERK2)表达水平及磷酸化水平。观察时点为初入组与治疗后第12周末均评测全部疗效指标与安全性指标,治疗第4周、第8周仅评测卵泡发育及内膜情况。随访时点在治疗结束后第4周末。所得数据采用SPSS17.0统计分析。结果:1.安全性评价对照组因二甲双胍所导致的不良反应发生率为43.3%,治疗组为25%。治疗前后两组患者均行血、尿、粪常规、肝功能、肾功能、心电图等安全性指标检查,结果显示两组患者安全性指标检测均未见明显异常。因无法耐受二甲双胍不良反应,退出临床试验的脱落率对照组为10%,治疗组为3.1%,提示针药人工周期疗法是较为安全的。2.疗效分析(1)中医症状评分分析①组内比较结果显示:治疗组及对照组治疗后中医症状积分较治疗前有明显下降,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能明显改善患者月经情况及临床症状,经配对秩和检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组中医症状积分差值显著高于对照组,认为治疗组能更好地缓解患者月经情况及临床症状,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)月经情况分析①组内比较结果显示:治疗组及对照组治疗后月经周期较治疗前有明显缩短,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能明显改善患者月经情况,经配对秩和检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组月经周期差值显著高于对照组,认为治疗组能更好地缓解患者月经情况,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)排卵率及妊娠率分析治疗组的排卵率(88%)和妊娠率(58.6%)均显著高于对照组的排卵率(73.3%)和妊娠率(26.1%),经卡方检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)肥胖体征分析①组内比较结果显示:治疗组及对照组治疗后体重、BMI、腰围等较治疗前有明显下降,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能明显改善患者肥胖体征,经配对t检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组体重、BMI、腰围等差值显著高于对照组,认为治疗组能更好地改善患者肥胖体征,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)性激素水平分析①组内比较结果显示:治疗组及对照组治疗后LH、LH/FSH、T等水平较治疗前有明显下降,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能有效调节患者生殖内分泌紊乱,经配对t检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组LH、LH/FSH、T等差值显著高于对照组,认为治疗组能更好地调节患者生殖内分泌紊乱,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)血脂水平分析①组内比较结果显示:治疗组及对照组治疗后TG、CHOL、LDL等水平较治疗前有明显下降,HDL水平较治疗前明显上升,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能有效改善患者的脂质代谢,经配对t检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组TG、CHOL、HDL、LDL等差值显著高于对照组,认为治疗组能更好改善患者的脂质代谢,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(7)胰岛素抵抗指标分析①组内比较结果显示..治疗组及对照组治疗后FPG、FINS、Ln(HOMA-IR)等水平较治疗前有明显下降,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能有效改善患者的胰岛素抵抗,经配对t检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组FINS、Ln(HOMA-IR)等差值显著高于对照组,认为治疗组能更好改善患者的胰岛素抵抗,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(8)miRNA和相关靶基因转录水平分析①组内比较结果显示:治疗组及对照组治疗后miR-143、AKTmRNA等水平较治疗前有明显升高,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能有效调控miRNA和相关靶基因转录水平,经配对t检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组miR-143、AKTmRNA等差值显著高于对照组,认为治疗组能更好调控miRNA和相关靶基因转录水平,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。(9)胰岛素信号通路相关蛋白表达水平及磷酸化水平分析①组内比较结果显示:治疗组及对照组治疗后AKT蛋白表达水平较治疗前有显著升高,P-AKT、AKT磷酸化比例、P-ERK1、ERK1磷酸化比例等较治疗前显著下降,认为针药人工周期疗法及二甲双胍均能有效调控胰岛素信号通路相关蛋白表达水平及磷酸化水平,经配对t检验,组内差异有统计学意义(P<0.05)。②组间比较结果显示:治疗组AKT、P-ERK1、P-ERK1磷酸化比例等差值显著高于对照组,认为治疗组能更好调控胰岛素信号通路相关蛋白表达水平及磷酸化水平,经独立样本秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.针药人工周期疗法可以有效改善患者月经情况、痰湿症状及肥胖体征,提高排卵率及妊娠率。2.针药人工周期疗法可以有效调节患者生殖内分泌紊乱。3.针药人工周期疗法可以有效改善患者胰岛素抵抗,其机制可能是通过调控miR-143及PI3K/AKT和MAPK/ERK两条胰岛素信号通路起作用。4.针药人工周期疗法治疗后安全性指标检测未见明显异常,且可以减少二甲双胍所导致的不良反应发生率及脱失率,说明安全性较好。5.针药人工周期疗法治疗肥胖型PCOS胰岛素抵抗,疗效好,安全性高,值得推广应用。