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抗菌肽(AMPs)是小于100个氨基酸的小分子多肽,在所有生物体内均有发现。其具有广谱的抗菌活性,被认为是生物体先天免疫系统的组成成分。抗菌肽具有不同于抗生素的作用特点,不易产生耐药性,是今后替代抗生素的理想生物饲料添加剂之一。已有研究表明,外源抗菌肽能促进家畜家禽生长,增强机体免疫水平,提高机体的抗感染能力。本研究以蛋鸡为研究对象,研究抗菌肽在蛋鸡上的应用效果,探讨外源抗菌肽对鸡内源性抗菌肽基因Gal-1、Gal-2以及IL-2基因在肝脏和脾脏组织中表达的影响,在分子水平上揭示外源抗菌肽对蛋鸡免疫的影响机理。
本研究分为两个部分:(1)通过饲养试验、生化分析、肠道菌群检测等研究了外源抗菌肽对蛋鸡产蛋性能、血清生化和免疫指标以及肠道菌群的影响。(2)利用实时荧光定量PCR技术检测了外源抗菌肽对蛋鸡脾脏和肝脏中Gal-1、Gal-2和IL-2基因表达的影响。试验选择600只210日龄海赛克斯蛋鸡随机分成5组,每组4个重复,每个重复30只鸡。第一组为对照组,饲喂基础日粮,第二组饲喂基础日粮中添加200mg/kg的金霉素。第三至五组分别饲喂基础日粮中添加200、400和600mk/kg的抗菌肽。研究的主要结果和结论如下:
第一部分:(1)同对照组相比,抗菌肽各组均能提高蛋鸡的平均蛋重(P>0.05)和蛋壳厚度(P>0.05)。400mg/kg组能显著提高蛋鸡的产蛋率,200和400mg/kg组显著提高蛋黄比率(P<0.05),抗菌肽组对其它产蛋性能指标无显著影响。同金霉素组相比,抗菌肽组能显著提高蛋鸡的产蛋率(P<0.05)。
(2抗菌肽能提高血清中SOD的活力,随着抗菌肽剂量的增加,SOD活力呈现升高的趋势,600mg/kg组达到显著提高(P<0.05)。
(3)抗菌肽能提高机体的免疫水平,400mg/kg组血清IgA和IgG的含量显著高于对照组(P<0.05),其它两组均有提高但不显著。所有抗菌肽组均能提高IgM和C3的含量,但差异不显著(P>0.05)。C4的含量有降低的现象(P>0.05)。金霉素组同对照组相比,免疫水平有下降的趋势,但差异不显著。
(4)抗菌肽组回肠中大肠杆菌的数量分别比对照组降低14.26%(P<0.05)、15.7%(P<0.05)、2.23%(P>0.05),回肠中乳酸杆菌的数量变化不大(P>0.05)。同时抗菌肽对盲肠中大肠杆菌以及乳酸杆菌数量均无显著性影响(P>0.05)。
第二部分:(1)抗菌肽能提高蛋鸡的脾脏指数,其中400mg/kg组对蛋鸡脾脏指数影响最为显著(P<0.05),其它两组不显著。金霉素组的脾脏指数低于其它组,其中与400mg/kg抗菌肽组差异显著。
(2)饲喂不同水平抗菌肽蛋鸡脾脏和肝脏中Gal-1的mRNA表达均无显著性差异(P>0.05),但均能提高脾脏和肝脏中Gal-2的表达,其中400mg/kg组表达水平均最高(P<0.05)。
(3)抗菌肽能提高脾脏和肝脏中IL-2的表达,在脾脏中400mg/kg表达水平最高(P<0.05),而在肝脏中600mg/kg组表达最高(P<0.05)。
(4)Gal-2基因可能与IL-2基因协同促进了蛋鸡抗体的产生。
综上所述,日粮中添加400mg/kg抗菌肽对蛋鸡产蛋性能以及机体免疫具有最佳的效果。