【摘 要】
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目的:研究甲醛诱导人脐静脉内皮细胞的损伤作用及其机制,以阐明内源性甲醛在动脉粥样硬化、糖尿病血管病变等血管内皮功能障碍性疾病中的意义。 方法:以不同浓度的甲醛(0,
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目的:研究甲醛诱导人脐静脉内皮细胞的损伤作用及其机制,以阐明内源性甲醛在动脉粥样硬化、糖尿病血管病变等血管内皮功能障碍性疾病中的意义。 方法:以不同浓度的甲醛(0,5,10,20,40,80gmol/L)与HUVEC-12细胞共培养24小时,以过氧化氢为阳性对照组,抗氧化剂维生素C为保护组;以40μmol/L甲醛与HUVEC-12细胞共培养(0,4,12,24,48,72)小时。H-E染色观察细胞形态学改变;MTT法检测细胞生长活性;分光光度法检测LDH漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中MDA的量;硝酸还原酶法检测细胞上清液中NO的含量;生化法检测NOS的活性;免疫细胞化学技术和RT-PCR技术,观察内皮型一氧化氮合酶和诱生型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达。实验数据以均数±标准差((?)±S)表示,用SPSS10.0进行统计学分析。 结果:甲醛呈浓度和时间依赖性地诱导内皮细胞的形态学损伤和凋亡,抑制细胞的生长活性,促进细胞乳酸脱氢酶漏出;甲醛呈浓度和时间依赖性地诱导内皮细胞上清液中MDA和NO的生成,24小时达高峰;甲醛呈浓度和时间依赖性地诱导抑制eNOS的活性及其在基因和蛋白水平的表达,诱导iNOS的活性及其在基因和蛋白水平的表达,24小时达高峰。 HUVEC-12细胞经100mg/L的VitC预处理30分钟后,再与40μmol/L甲醛共培养24小时后,与40μmol/L甲醛处理组比较,细胞的形态学损伤减轻,细胞生长活性增加,细胞乳酸脱氢酶漏出降低;细胞上清液中MDA和NO的含量降
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