调控胚胎干细胞分化的细胞极性分子的筛选

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背景:在多细胞生物,细胞间的差异是通过在不对称分裂来获得,这种不对称分裂即体现了细胞的极性。胚胎干细胞的不对称分裂,对自身干细胞数目的稳定和组织动态平衡和修复发挥了重要的作用。目前多种极性分子参与了此分化过程,筛选出这些极性分子对于了解细胞极性的建立和机制至关重要。  目的:以胚胎干细胞为研究胚胎发育学的工具,筛选出能调控细胞分化方向的细胞极性相关分子。  方法培养胚胎干细胞,分别收集0天,2天,4天,6天,8天,10天,12天的细胞样本,通过qRT-PCR来检测细胞极性分子mRNA的表达。  结果:在胚胎发育过程中,细胞极性相关分子mRNA的表达呈现不同水平及变化趋势:  部分极性相关分子基因亚型在小鼠胚胎干细胞分化过程中不表达(如Par6b,crumb1,mpp3,mpp4,mpp6,dlg2,mark1,prox2,miranda);部分基因的表达在发育过程中显著上调,尤其是Par3B,Crumb2,crumb3,Dlg4及Prox1,他们的表达水平增加至少10倍以上;部分基因在小鼠胚胎干细胞分化发育过程中,表达水平无显著性的改变。  结论:部分极性分子,尤其是Par3B,Crumb2,crumb3,Dlg4及Prox1等可能在胚胎干细胞向心肌细胞方向分化过程中起调控作用。为进一步进行基因敲除,观察该基因在调控干细胞心肌分化的作用提供实验基础。
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