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盐胁迫由于其对植物生长和发育造成渗透胁迫和离子毒害,成为影响生态环境和农业生产的重要因子之一。Na+/H+逆向转运蛋白是调节胞质中Na+水平的重要蛋白之一,近年来,由于编码该蛋白的基因(AtNHX1)在培育耐盐性植物上的成功应用,该基因及其同源基因越来越引起研究者的兴趣。AtNHX5基因的表达只受Na+专一性的调控,这对研究植物如何响应盐胁迫的Na+单离子的毒害有重要的意义。
本论文将AtNHX5基因导入水稻基因组,研究转基因植株的生长特性和耐盐性,获得如下结果:
1.通过根癌农杆菌介导的方法将拟南芥AtNHX5基因(AF490589)导入水稻中花“11”,共获得25个抗潮霉素基因的株系。PCR检测证明以上株系均为阳性。随机挑选6个株系进行Southernblot和Northernblot检测,结果表明这6个被检测的株系均有杂交信号,说明AtNHX5已成功地被导入水稻基因组并在转基因株系中表达。
2.与野生型(WT)相比,转基因株种子(T)萌发早,胚根生长迅速,但植株发育高度、株型、抽穗期、种子成熟期等生物学特征中,转基因株与WT没有可见的差异。
3.分析了野生型(WT)和转基因株系T8、T22、T24株系的耐盐性,结果表明,转基因株系的耐盐性均明显地高于野生型,说明在水稻中异源表达AtNHX5能提高转基因株的耐盐性。
4.在盐胁迫下,超表达AtNHX5基因提高了转基因株叶鞘富集Na+的能力及保持其吸收K+的能力。
上述结果说明:AtNHX5可应用于提高水稻的耐盐性。AtNHX5提高转基因水稻的耐盐性可能与该基因有提高转基因株叶鞘富集Na+离子的能力有关。