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本论文对重组蛋白TATm-survivin(T34A)的可溶性表达和纯化条件进行优化,首次获得了高度可溶及高纯度的目标蛋白。表达载体,锌离子以及诱导温度对目标蛋白的可溶性表达均有促进作用。通过采用重组载体pET-22b(+)-TAT-survivin(T34A),诱导前添加0.5 mmol l-1锌离子,并将诱导温度降为25℃,92％的目标蛋白(可溶性目标蛋白占总目标蛋白的比例)以可溶形式存在于细胞质中,可溶性目标蛋白的表达水平为25.2％(可溶性目标蛋白占总可溶性细胞蛋白的比例)。重组可溶性蛋白TATm-survivin(T34A)的纯化包括可溶性目标蛋白的释放以及层析介质的选择。热处理法对可溶性TATm-survivin(T34A)的提取是有利的。与超声破碎法相比,热处理法可以明显的浓缩目标蛋白,提高目标蛋白的纯度。肝素亲和层析对目标蛋白的纯化具有较高的选择性,揭示了该目标蛋白具有可以与肝素特异性亲和的性质。筛选出了重组可溶性TATm-survivin(T34A)的纯化方案：热处理法释放胞内可溶性目标蛋白；硫酸铵分级沉淀；DEAE Sepharose FF层析；Heparin Bio-sep CL-6B亲和层析。最终目标蛋白的纯度在95％以上,整体收率4-6％。可溶性TATm-survivin(T34A)的表达与纯化避免了复杂的变复性过程并初步揭示了该目标蛋白特有的一些理化性质,具有较高的理论价值和广泛的应用前景。为了对复性及分离纯化效果进行评价,本论文通过MTT法对纯化后的目标蛋白进行体外活性检测。结果发现,重组蛋白TATm-survivin(T34A)(包涵体和可溶性)对三种细胞株(人胰腺癌细胞株SW1990,人宫颈癌细胞株Hela和人乳腺癌细胞株Bcap-37)的增殖均有较好的抑制作用,且该抑制作用具有剂量依赖性,表明包涵体的复性及可溶性的纯化方法是可行而有效的,得到了具有生物活性的重组蛋白。与包涵体复性纯化后的重组蛋白相比,可溶性纯化后的重组蛋白体外抗肿瘤活性较低,可能与二者的折叠状态有关。以乳腺癌细胞为研究对象,重组蛋白TATm-survivin(T34A)对Bcap-37细胞的增殖抑制作用具有浓度和时间依赖性,当药物作用时间从24h增加到36h,IC50值由51.9降为22.6μg ml-1,揭示该药物在乳腺癌的治疗方面具有很大的潜力。