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目的:研究mi R-1264对喉癌Hep2细胞生物学功能的影响;通过实验验证mi R-1264是否参与下调喉癌抑癌基因LCRG1的表达。方法:1、利用MTT、Transwell及流式细胞术,观察瞬时转染mi R-1264mimic/inhibitor对Hep2细胞增殖、迁移和凋亡等生物学行为的影响。2、利用luciferase报告基因实验验证软件预测的mi R-1264和LCRG1基因3′UTR的结合位点。3、利用Real-time PCR实验检测瞬转mi R-1264 mimic/inhibitor后的Hep2细胞mi R-1264表达情况。4、利用蛋白免疫印迹实验明确瞬时转染mimic/inhibitor Negative Control(NC)对照组、mi R-1264 mimic/inhibitor实验组及空白组LCRG1蛋白的表达变化。结果:1、MTT实验结果显示:与NC对照组和空白组相比,Hep2细胞瞬时转染mi R-1264 mimic后,活细胞数量明显增加,增殖能力受到显著增强(P<0.05);而瞬时转染mi R-1264 inhibitor后,活细胞数量明显降低,增殖能力减弱(P<0.05)。表明下调mi R-1264使Hep2细胞的增殖能力减弱。2、Transwell实验结果显示:与NC对照组和空白组相比,Hep2细胞瞬转mi R-1264 mimic后,迁移、侵袭细胞数量明显增加,迁移及侵袭能力受到明显加强(P<0.05);相反地,瞬转mi R-1264 inhibitor后,迁移、侵袭细胞数量明显降低,迁移及侵袭能力减弱(P<0.05)。流式细胞术结果显示:mi R-1264 inhibitor实验组G1期百分率、凋亡率均高于NC组和空白组,说明mi R-1264表达下调能够诱导细胞凋亡,使细胞周期主要阻滞于G1期。3、双荧光素酶实验表明mi R-1264与LCRG1 3′UTR的第一个结合位点可能是mi R-1264潜在的结合位点。4、Real-time PCR实验结果显示:瞬时转染mi R-1264 mimic可使Hep2细胞的mi R-1264表达显著上调(P<0.05);相反地,瞬时转染mi R-1264 inhibitor后可使mi R-1264表达下调(P<0.05),结果说明瞬时转染成功。5、蛋白免疫印迹实验结果显示:Hep2细胞瞬转mi R-1264 mimic后,实验组LCRG1蛋白表达较mimic NC对照组和空白组无明显差异(P>0.05),mimic NC组和空白组LCRG1蛋白表达亦无明显差异(P>0.05);瞬转mi R-1264 inhibitor后,mi R-1264 inhibitor实验组LCRG1蛋白表达较inhibitor NC组和空白组均无明显差异(P>0.05)。结论:1、mi R-1264能使Hep2细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡能力增强。2、mi R-1264可能不参与LCRG1蛋白的表达下调。